商品詳情:
別稱 DC 2.4
生長特性 懸浮細胞
生長培養(yang) 基 DMEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳(chuan) 代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yang) 條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃

商品屬性:
產(chan) 品名稱 | DC2.4小鼠骨髓來源樹突狀細胞係 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6621 | 種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 懸浮細胞 | 細胞形態 |
|
細胞係培養(yang) 步驟:
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇:
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後,在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中(其中胎牛血清約為(wei) 10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,製成細胞懸液,接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展,為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本。
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇:
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後,在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中(其中胎牛血清約為(wei) 10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,製成細胞懸液,接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展,為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本
公司正在出售的產(chan) 品:
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細胞接收後的處理:
1)DC2.4小鼠骨髓來源樹突狀細胞係收到細胞後,75%酒精瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h,若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染,請拍照後及時聯係我們(men) 。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存,作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yang) 箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會(hui) 因振動脫落和脫落後成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yang) 瓶中灌液培養(yang) 基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yang) 瓶中),加入新配製的培養(yang) 基6-8mL,放到細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳(chuan) 代處理。傳(chuan) 代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yang) 基(灌液培養(yang) 基)不能再用來培養(yang) 細胞,請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。 收到細胞後次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1:2傳(chuan) 代 。
一.培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yang) 基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yang) 條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。