兔原代脂肪幹原代細胞
細胞培養(yang) 操作:

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang)
傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態
傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1:2傳(chuan) 代,1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿
傳(chuan) 代方法:
1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中,輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後,吸出多餘(yu) 消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後,再加入5ml培養(yang) 基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代,然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL,置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ;
4.待細胞貼壁後,培養(yang) 觀察;之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。
商品屬性:

規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3943 |
種屬來源 | 兔 | 組織來源 | 脂肪 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態特征 | 成纖維細胞樣 |
形態:成纖維細胞樣
培養(yang) 基:兔脂肪幹細胞wan全培養(yang) 基
培養(yang) 環境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳(chuan) 代特征:可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態

細胞基本屬性:

種屬來源:兔
組織來源:脂肪脂肪
生長特性:貼壁生長
產(chan) 品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:
產(chan) 品貨期:5-6周左右
運輸方式:T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞(包郵)
供應限製:僅(jin) 限於(yu) 科學研究,絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用
背景介紹::兔脂肪幹細胞采用膠原酶消化法製備而來,兔脂肪幹細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏鬆結締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經血液輸送到各組織以供利用。它們(men) 影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nei) 皮功能、纖溶活動及炎症反應,參與(yu) 多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為(wei) 能量儲(chu) 存的器官而成為(wei) 一個(ge) 極其重要的內(nei) 分泌係統。脂肪幹細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的幹細胞,主要恢複組織細胞的修複功能,促進細胞的再生,恢複年輕麵容的同時,身體(ti) 機能也得到充分改善,有效改善亞(ya) 健康、早衰等疾病,由內(nei) 而外真正的有效抵抗衰老。脂肪幹細胞具有很多優(you) 點:①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對供區的創傷(shang) 較小;④獲得率及體(ti) 外擴增速率高。脂肪幹細胞是目前被廣泛應用於(yu) 組織工程領域中理想的種子細胞。根據不同來源及分化階段,幹細胞可分為(wei) 胚胎幹細胞和成體(ti) 幹細胞胚胎幹細胞具有分化為(wei) 多種不同組織的能力,但在倫(lun) 理上存在爭(zheng) 議。成體(ti) 幹細胞因其來源廣泛、增殖能力強等特點,現已成為(wei) 組織工程學研究的種子細胞。其中,脂肪幹細胞作為(wei) 組織工程修複的種子細胞,因其具有來源豐(feng) 富、取材容易、增殖能力強等優(you) 點,正受到越來越多的關(guan) 注。脂肪幹細胞形態類似成纖維細胞,具有較強的增殖能力。在一定的誘導條件下,可分化為(wei) 脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞、心肌細胞、上皮細胞等,具有多向分化潛能。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括:

一、剝離組織,去除外膜、結締組織等:將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出,並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。
二、洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊:使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織,然後將其剪成約1mm大小的小塊。
三、用0.1%~0.2%的消化:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩衝(chong) 液中,進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。
四、吹打分散後,過濾、計數:將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中,然後過濾、計數。
五、按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) :將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。
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