小鼠原代脂肪幹原代細胞

商品屬性：

形態：成纖維細胞樣
培養(yang) 基：小鼠脂肪幹細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基（IMP-M225-1）

培養(yang) 環境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳(chuan) 代特征：可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：脂肪脂肪

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:小鼠脂肪幹細胞采用膠原酶消化法製備而來，小鼠脂肪幹細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏鬆結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經血液輸送到各組織以供利用。它們(men) 影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nei) 皮功能、纖溶活動及炎症反應，參與(yu) 多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為(wei) 能量儲(chu) 存的器官而成為(wei) 一個(ge) 極其重要的內(nei) 分泌係統。脂肪幹細胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的幹細胞，主要恢複組織細胞的修複功能，促進細胞的再生，恢複年輕麵容的同時，身體(ti) 機能也得到充分改善，有效改善亞(ya) 健康、早衰等疾病，由內(nei) 而外真正的有效抵抗衰老。脂肪幹細胞具有很多優(you) 點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區的創傷(shang) 較小；④獲得率及體(ti) 外擴增速率高。脂肪幹細胞是目前被廣泛應用於(yu) 組織工程領域中理想的種子細胞。 根據不同來源及分化階段，幹細胞可分為(wei) 胚胎幹細胞和成體(ti) 幹細胞胚胎幹細胞具有分化為(wei) 多種不同組織的能力，但在倫(lun) 理上存在爭(zheng) 議。成體(ti) 幹細胞因其來源廣泛、增殖能力強等特點，現已成為(wei) 組織工程學研究的種子細胞。其中，脂肪幹細胞作為(wei) 組織工程修複的種子細胞，因其具有來源豐(feng) 富、取材容易、增殖能力強等優(you) 點，正受到越來越多的關(guan) 注。脂肪幹細胞形態類似成纖維細胞，具有較強的增殖能力。在一定的誘導條件下，可分化為(wei) 脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞、心肌細胞、上皮細胞等，具有多向分化潛能。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

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