綜合微生物的培養(yang) 方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)製備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配製培養(yang) 材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yang) ;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yang) ;
(5)分離並檢測;
(6)取液儲(chu) 存;通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強,培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
規格參數:
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
紅平紅球菌說明書(shu) | Rhodococcu | EY-J963412 |
資源名稱: 紅平紅球菌
種屬: Rhodococcus erythropolis
提供形式: 凍幹粉
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 芳烴類固醇
培養(yang) 基: 營養(yang) 肉汁瓊脂:蛋白腖 10.0 g,牛肉提取物 3.0 g,NaCl 5.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0
生長條件: 30℃,好氧
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個(ge) 月,若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個(ge) 月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中,密封於(yu) 安瓿管內(nei) ,然後控製冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置於(yu) -150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) :
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基,培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1%,氮源不超過0.5%),碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境,不利於(yu) 放線菌孢子的形成,氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下,幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃,少數為(wei) 37 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 5~14天。
⑵ 黴菌孢子的製備
黴菌的孢子培養(yang) ,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖,而且這類培養(yang) 基的表麵積較大,可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25~28 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 4~14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*,並易被菌體(ti) 分解利用,氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃,子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備
種子罐種子製備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中,經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ,這樣的種子稱為(wei) 一級種子,把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ,經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ,這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子,將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為(wei) 四級發酵。
Polyporus│leptocephalus (Jacq.) Fr. 中文名稱:黃多孔菌Polyporus│leptocephalus (Jacq.) Fr.分離基物:子實體(ti) 提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:150生長條件:25存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:98%
Penicillium│restrictum J.C. Gilman & E.V. Abbott 中文名稱:局限青黴Penicillium│restrictum J.C. Gilman & E.V. Abbott分離基物:土壤提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:28存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:98%
Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl. 中文名稱:可可球二孢Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.分離基物:變色木材提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧。生長特性在PDA平板培養(yang) 基:上(30℃、RH70%)菌落初為(wei) 灰白色,後變為(wei) 灰褐至褐黑色,培養(yang) 基:為(wei) 黑色,日生長量為(wei) 4.0cm;在全光條件下,15~20d產(chan) 生黑色近球狀子實體(ti) ,子座表麵附滿菌絲(si) 。一個(ge) 子座內(nei) 有多個(ge) 分生孢子器,近球形,180.0~318.9×157~436.0μm;孔口周緣細胞深褐色,未成熟分生孢子單細胞、無色,為(wei) 成熟孢子壁比成熟的分生孢子壁更厚,平均1.4μm;成熟的分生孢子雙細胞褐色至黑色,表麵有黑白相間的縱條紋,平均22.1×12.9μm;存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:98%
Sarocladium sp. 中文名稱:帚枝黴屬(斜麵)Sarocladium sp.提供形式:凍幹安全等級:1模式菌株:未知培養(yang) 方法培養(yang) 基:綜合PDA+乳糖( 1升普通PDA加5g乳糖):馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:22℃,好氧 純度:98%
Fusarium│sp. 中文名稱:鐮孢黴Fusarium│sp.提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法;定期移植法 純度:98%
Phomopsis sp. 中文名稱:擬莖點黴(斜麵)Phomopsis sp.分離基物:根莖提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法;定期移植法 純度:97%
Pleurotus│djamor (Rumph. ex Fr.) Boedijn 中文名稱:淡紅側(ce) 耳Pleurotus│djamor (Rumph. ex Fr.) Boedijn分離基物:子實體(ti) 提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;定期移植法 純度:97%
Alrnaria│alrnata (Fr.) Keissl. 中文名稱:交鏈孢黴Alrnaria│alrnata (Fr.) Keissl.分離基物:枝幹提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法;定期移植法 純度:97%
紅平紅球菌說明書(shu) CD147/TCSF 細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子抗體(ti) 豆腐果苷3,5-二苯硫酚Human PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit
CD160/By55 NK細胞受體(ti) BY55抗體(ti) 拉西坦2,3-二苯硫酚Human TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit
CD161/NK1.1 CD161抗體(ti) 夫拉紮勃(原:呋咱甲氫龍)2,3-二苯硫酚Human PINP (Procollagen I N-terminal Propeptide ) ELISA Kit
CD163/M130 CD163抗體(ti) 2,3-二苯硫酚Human KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit
CD166/ALCAM/MEMD 活化白細胞粘附分子抗體(ti) 3--5-(基)Human ADCY2 (Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit
CD158a/KIR2DL1 NK細胞抑製性受體(ti) 2DL1抗體(ti) 13--5-(基)Human AGGF1 (Angiogenic Factor with G Patch and FHA Domains 1) ELISA Kit
CD158e NK細胞抑製性受體(ti) 3DL1抗體(ti) T反式二-(m)-雙[2-(二鄰甲苯基膦)苄基]乙二鈀(II)Human C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit
CD158b2 NK細胞抑製性受體(ti) 2DL3抗體(ti) 反式二-(m)-雙[2-(二鄰甲苯基膦)苄基]乙二鈀(II)Human C5a (Complement Component 5a) ELISA Kit