小鼠原代卵巢顆粒原代細胞

商品屬性：

形態：上皮細胞樣
培養(yang) 基：小鼠卵巢顆粒細胞wan全培養(yang) 基

培養(yang) 環境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳(chuan) 代特征：可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態最佳

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：卵巢卵巢

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:小鼠卵巢顆粒細胞采用先機械分離，而後膠原酶消化，最後差速貼壁法製備而來，小鼠卵巢顆粒細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chan) 生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與(yu) 睾丸相同，僅(jin) 左側(ce) 發育（右側(ce) 已退化），呈葡萄狀，均為(wei) 處於(yu) 不同發育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表麵密布血管。卵巢的大小與(yu) 年齡和產(chan) 卵期有關(guan) 。大多數脊椎動物有兩(liang) 個(ge) 卵巢，但是部分魚類的兩(liang) 個(ge) 卵巢融合為(wei) 單個(ge) 結構，而所有鳥類隻有左側(ce) 卵巢有機能。卵巢是位於(yu) 子宮兩(liang) 側(ce) 的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內(nei) 部結構可分為(wei) 皮質和髓質。皮質位於(yu) 卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位於(yu) 中央，由疏鬆結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞，其增殖與(yu) 分化直接影響著卵泡的生長啟動、發育、排卵、黃體(ti) 形成以及甾體(ti) 激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細胞是卵泡內(nei) 的最大細胞群，也是主要的功能細胞，卵泡發育的顯著標誌之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖，而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起，尤其在卵泡發育後期，此外，顆粒細胞還與(yu) 卵泡膜細胞共同完成卵巢激素的合成，維持著有利於(yu) 卵母細胞生長和成熟的微環境。細胞形狀呈圓形或橢圓形。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

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