小鼠原代胃平滑肌原代細胞

商品屬性：

形態：成纖維細胞樣
培養(yang) 基：小鼠胃平滑肌細胞wan全培養(yang) 基

培養(yang) 環境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳(chuan) 代特征：可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：胃胃

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:小鼠胃平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法製備而來，小鼠胃平滑肌細胞分離自胃組織；胃柔軟，活體(ti) 呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構成。粘膜上皮為(wei) 柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構成大量腺體(ti) （胃底腺、賁門腺、幽門腺），它們(men) 的分泌物混合形成胃液，對食物進行化學性消化。粘膜在幽門處由於(yu) 覆蓋幽門括約肌的表麵而形成環狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構成，外層縱形，中層環形，內(nei) 層斜行，其中環形肌發達，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層，細胞通過緊密連接，進行同步性運動，完成肌肉的舒縮活動，以推動食物前進，完成對食物的機械性消化，並促進化學性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性，如興(xing) 奮、自律性、傳(chuan) 導性和收縮性，在離體(ti) 後，置於(yu) 適宜的環境內(nei) ，仍能進行良好的節律性運動，但其收縮很緩慢，節律性遠不如心肌規則。胃平滑肌對電刺激較不敏感，但對於(yu) 牽張、溫度和化學刺激則特別敏感，輕微的刺激常可引起強烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與(yu) 它所處的生理環境分不開的，胃內(nei) 容物對平滑肌的牽張、溫度和化學刺激是引起內(nei) 容物推進或排空的自然刺激因素。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

公司正在出售的產(chan) 品：