小鼠原代冠狀動脈內(nei) 皮原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：冠狀動脈冠狀動脈

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：4周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:小鼠冠狀動脈內(nei) 皮細胞采用混合酶短暫消化後組織貼塊、結合內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，小鼠冠狀動脈內(nei) 皮細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心髒血液的動脈，起於(yu) 主動脈根部，分左右兩(liang) 支，行於(yu) 心髒表麵。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為(wei) 三型：右優(you) 勢型、均衡型、左優(you) 勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為(wei) 一短幹，發自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行後，立即分為(wei) 前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈麵與(yu) 右冠狀動脈的後室間支相吻合。冠狀動脈內(nei) 皮細胞呈單層扁平分布，是一薄層的專(zhuan) 門上皮細胞，它形成冠狀動脈的內(nei) 壁，是血管管腔內(nei) 血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nei) 皮細胞是沿著整個(ge) 循環係統，由心髒直至最小的微血管。內(nei) 皮細胞層是血液和其它組織的天然屏障。內(nei) 皮細胞功能病變是造成動脈粥樣硬化的主要原因。內(nei) 皮細胞同時會(hui) 合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解係統的增強和抑製物，以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們(men) 同時也會(hui) 分泌控製細胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。人內(nei) 皮細胞會(hui) 分泌t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應TNF-α，繼而分泌細胞因子GM-CSF，表達ICAM-1表麵抗體(ti) ，產(chan) 生大量的一氧化氮和endothelin。經皮冠狀動脈腔內(nei) 成形術（PTCA）造成的內(nei) 皮細胞受損和功能破壞可能是導致術後動脈再狹窄的重要原因。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：