小鼠原代滑膜成纖維原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：關(guan) 節組織關(guan) 節組織

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:滑膜是關(guan) 節囊的內(nei) 層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏鬆結締組織組成。關(guan) 節腔內(nei) 的所有結構，除關(guan) 節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關(guan) 節腔的肌腱、韌帶等均全部為(wei) 滑膜所包裹。滑膜分泌滑液，在關(guan) 節活動中起重要作用。正常滑膜分為(wei) 兩(liang) 層，即薄的細胞層(內(nei) 腔層)和血管層(內(nei) 膜下層)，是血管豐(feng) 富的關(guan) 節囊內(nei) 膜，貼附於(yu) 非關(guan) 節麵部分，覆蓋於(yu) 關(guan) 節囊內(nei) 的骨麵上，不在軟骨麵上，此部分稱為(wei) 邊緣區或“裸區"。滑膜呈粉紅色，光滑發亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，內(nei) 含膠原性纖維。滑膜細胞有A、B兩(liang) 型。巨噬細胞樣A型細胞，表麵有絲(si) 狀偽(wei) 足、漿膜內(nei) 陷、囊泡、線粒體(ti) 、溶酶體(ti) 、胞漿纖維和高爾基體(ti) ，具有吞噬功能；B型成纖維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內(nei) 質網結構，是介導 RA 關(guan) 節破壞的主要細胞。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：