實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

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細胞名稱  綿羊皮膚細胞；OAR-S1
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雌性迪慶綿羊的耳部皮膚組織。1994年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yang) 條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳(chuan) 代方法: 1：2傳(chuan) 代；3-4天一次

傳(chuan) 代情況: P5

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 熒光法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
單抗MG7相關(guan) 抗原檢測試劑盒細胞名稱: 人腎小管上皮細胞；HKC形態特性: 多角MG7Ag

單鏈DNA結合蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴瘤細胞Jurkat亞(ya) 係；Jurkat77形態特性: 圓形Single-stranded DNA-binding protein

蛋白Z依賴的蛋白酶抑製劑檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；LoVo形態特性: 上皮樣Protein Z Dependent Protease Inhibitor

蛋白激酶C-β1檢測試劑盒細胞名稱: 人口腔表皮樣癌細胞；KB形態特性: 上皮樣protein kinase C- β1

蛋白酶激活受體(ti) 4檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠癌細胞；CCC-Ca761-03形態特性: 上皮樣Protease Activated Receptor 4

低半乳糖化IgA檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；SW480[SW480；SW-480]形態特性: 上皮樣Immunoglobulin A

低密度脂蛋白受體(ti) 相關(guan) 蛋白6檢測試劑盒細胞名稱: Sars結構蛋白表達株；293sars181A形態特性: 上皮樣low-density lipoprotein-receptor-related protein 6

丁型肝炎IgG抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 人腎癌細胞；A498形態特性: 上皮樣Hepatitis D virus IgG

蕈型乙酰膽受體(ti) 亞(ya) 型M2抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 人細胞；C-33A形態特性: 上皮樣M-AChRM2 antibody

多環芳烴-DNA加合物檢測試劑盒細胞名稱: 人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS形態特性: 淋巴母細胞樣PAHs-DNA

多配體(ti) 蛋白聚糖4檢測試劑盒細胞名稱: 人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2形態特性: 上皮樣Syndecan-4

多效生長因子檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠腦膠質瘤細胞；C6形態特性: 成纖維細胞樣Pleiotrophin

多藥耐藥相關(guan) 蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 兔角膜前基質層成纖維細胞；RCFBF形態特性: 成纖維樣Multidrug Resistance Associated Protein

多藥耐藥相關(guan) 蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 人鼻咽癌細胞；E-2Z[E2Z]形態特性: 上皮樣Multidrug Resistance Associated Protein 1

齶肺鼻上皮癌相關(guan) 蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人胚胎腸粘膜組織來源細胞；CCC-HIE-2形態特性: Palate;Lung And Nasal Epithelium Associated Protein

兒(er) 茶酚胺 檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴瘤轉基因細胞；JurkatD,E形態特性: 圓形Catecholamine

二級淋巴組織趨化因子檢測試劑盒細胞名稱: 人胚胎肌肉組織來源細胞；CCC-HSM-2形態特性: 梭形secondary lymphoid-tissue chemokine
綿羊皮膚細胞；OAR-S1麥康凱瓊脂（SMAC）平板（9cm）規格：10個(ge) /包用途：用於(yu) 大腸杆菌O157的分離培養(yang)

SIM培養(yang) 基規格：250g用途：用於(yu) 硫化氫、動力、吲哚試驗

B5培養(yang) 基規格：250g用途：用於(yu) 植物組織培養(yang)

左藥敏紙片規格：5μg/片，20片/瓶拉丁屬名：Levofloxacin（LVF）

玻璃三角塗布棒詳情介紹 品名：玻璃三角塗布棒

MS培養(yang) 基（含瓊脂，不含蔗糖）規格：250g用途：用於(yu) 植物組織培養(yang) 的基礎培養(yang) 基