實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
乳腺癌細胞；Hs578T | 貼壁生長 | EY-X63570 |
細胞名稱 乳腺癌細胞；Hs578T
形態特性: 上皮細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: Hs578T細胞株源自乳房癌。它與(yu) 正常成纖維細胞樣細胞株Hs578Bst起源於(yu) 同一位患者。Hs578T細胞株最初是多角形的，但在傳(chuan) 代過程中選擇並了星形的細胞形態。電鏡下觀察到酪蛋白顆粒聚集，橋粒，緊密連接，脂質體(ti) 和光滑內(nei) 質網小泡。與(yu) Hs578Bst一樣，未檢測到雌激素受體(ti) 和內(nei) 生病毒。
培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(you) 質胎牛血清，10%；0.01mg/ml牛胰島素
傳(chuan) 代方法: 消化3-5分鍾。1:2。3天內(nei) 可長滿。
傳(chuan) 代情況: P(49+5)
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
Mycoplasma primatum Del Giudice et al.細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞NC-
36372Human SPTBN1 ELISA Kit
雜交瘤株；2F4拉丁屬名: Tardiphaga robiniae5-溴吡啶-3-甲酸Human SPOCK1 ELISA Kit
小鼠骨髓雜交瘤株；10H4拉丁屬名: Phytophthora syringoe5-溴吡啶-3-甲酸Human SPTBN2 ELISA Kit
小鼠骨髓雜交瘤株； 10B11注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用5-溴吡啶-3-甲酸Human SSTR5 ELISA Kit
雜交瘤株；FFA-C注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用抗氧劑1076Human SPPL2A ELISA Kit
雜交瘤株；FABP 4A8注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用抗氧劑1076Human HDAC8(Histone deacetylase 8) ELISA Kit
雜交瘤株；2-2拉丁屬名: Paenibacillus pinihumi抗氧劑1076Human Sprr2i ELISA Kit
雜交瘤株；9-1拉丁屬名: Escherichia coli二甲基烯酸1,4-丁二酯Human SPR ELISA Kit
雜交瘤株；9-2拉丁屬名: Bosea lathyri3-甲基-2-丁硫Human SRBD1 ELISA Kit
雜交瘤株；49-2拉丁屬名: Bacillus sp.3-甲基-2-丁硫Human SPRR3 ELISA Kit
雜交瘤株；1-35-1拉丁屬名: Hyphoderma setigerum1-甲基呱啶基-2-甲Human SPRY2 ELISA Kit
雜交瘤株；13-2拉丁屬名: Rhizobium giardinii1-甲基呱啶基-2-甲Human SPRY3 ELISA Kit
雜交瘤株；10-2拉丁屬名: Micrococcus sp.1-甲基呱啶基-2-甲Human SPATS2L ELISA Kit
雜交瘤株；8-1注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用8-羥基喹啉鋁Human SPRY4 ELISA Kit
雜交瘤株；23-1注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用8-羥基喹啉鋁Human SPRYD5 ELISA Kit
雜交瘤株；18-1拉丁屬名: Escherichia coli8-羥基喹啉鋁Human MYOG(Myogenin) ELISA Kit
雜交瘤株；27-1拉丁屬名: Saccharomyces pastorianusN,N'-二叔丁氧羰基-L-Human SPTLC2 ELISA Kit
雜交瘤株；T-Ⅱ用途: Degrades celluloseN,N'-二叔丁氧羰基-L-Human SPCS1 ELISA Kit
雜交瘤株；COC1501用途: 植物病原物，為該病防治提供依據4-O-(β-吡喃半乳糖)-D-吡喃甘露糖苷Human SPRED2 ELISA Kit
雜交瘤株；PCP1310注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，
乳腺癌細胞；Hs578T人抗乙型肝炎病表麵抗體(ti) (HBsAb)ELISA試劑盒SykELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人抗乙型肝炎病核心IgG抗體(ti) (HBcAb-IgG)ELISA試劑盒T.gondiiELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(ti) (HBcAb-IgM)ELISA試劑盒T3ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人抗乙型肝炎病核心抗體(ti) (HBcAb)ELISA試劑盒T3ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人天門冬氨轉氨酶/穀草轉氨酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒T3ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人丙氨轉氨酶/穀丙轉氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒T3ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人乙型肝炎表麵抗原(HBsAg)ELISA試劑盒T3ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
人基質金屬蛋白酶組織抑製因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒T4ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
