公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小耳豬肺細胞;SEP-L2 | 貼壁生長 | EY-X63758 |
細胞名稱 小耳豬肺細胞;SEP-L2
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雄性小耳豬的肺組織。1988年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yang) 條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次
傳(chuan) 代情況: P2
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Procyanidin B5
CAS No.:12798-57-1
中文名:原花青素B5
分子式:C30H26O12
磺 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶22(ADAM22) 規格: 100mg
雙羥噻 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶28(ADAM28) 規格: 50mg
紅豆蔻 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33) 規格: 1g
蓮子 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8) 規格: 5g
積雪草 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8) 規格: 1.2g
木犀草苷 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8) 規格: 20mg
胡黃連 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9) 規格: 0.5g
雙羥 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9) 規格: 50mg
抗眼鏡蛇血 訂購|谘詢 解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9) 規格:
阿洛林 訂購|谘詢 羧基賴(CML) 規格: 100mg
酒石長春瑞濱 訂購|谘詢 羧肽酶A1(CPA1) 規格: 50mg
4差向金 訂購|谘詢 羧肽酶A2(CPA2) 規格: 50mg
羅漢果苷IV 訂購|谘詢 羧肽酶A3(CPA3) 規格: HPLC≥98%,20mg/支;
Hederacolchiside A1 訂購|谘詢 羧肽酶A3(CPA3) 規格: HPLC≥98%;5mg/支
遼東(dong) 楤木皂苷V 訂購|谘詢 羧肽酶A3(CPA3) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
秦皮素;秦皮亭;白蠟樹內(nei) 酯 訂購|谘詢 羧肽酶A4(CPA4) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
辛辣內(nei) 酯A 訂購|谘詢 羧肽酶A5(CPA5) 規格: 5mg/支
花旗鬆素;二氫槲皮素;紫杉葉素;黃杉素 訂購|谘詢 羧肽酶A6(CPA6) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
VPS4a 液泡分選蛋白4抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, anhydrous
APC5 細胞分裂周期蛋白5抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Ferrozine
BRD7 鼻咽癌相關(guan) 轉錄調節蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Sodium acetate, trihydrate
BRRN1/CAPH 染色體(ti) 相關(guan) 蛋白H抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Thidiazuron
CDC123/C10orf7 細胞分裂周期蛋白CDC123抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Iodine
CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體(ti) 現貨供應 0.2ml ADA, Alcohol dehydrogenase
CDC20B 細胞分裂周期蛋白20B抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Tween80
cb1ip1 周期蛋白B1結合蛋白1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Tween80
妥英標準品 規格:250mg 英文名稱:Fosphenytoin Sodium
七氟相關(guan) 物質C標準品 規格:0.2ml 英文名稱:
卡維地相關(guan) 物質B標準品 規格:15mg 英文名稱:
標準品 規格:200mg 英文名稱:Cefdinir
牡荊樹提取物標準品 規格:1.5g 英文名稱:Powdered Chaste Tree Extract
相關(guan) 物質A標準品 規格:50mg 英文名稱:
萘標準品 規格:200mg 英文名稱:Naphthalene
度西汀雜質A標準品 規格:10mg 英文名稱:
扁桃標準品 規格:500mg 英文名稱:Mandelic Acid (AS)
羧甲基澱粉標準品(A型) 規格:400mg 英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type A
小耳豬肺細胞;SEP-L2YM11瓊脂規格:250g用途:濾膜法用於(yu) 黴菌、酵母菌的分離培養(yang)
賴氨脫羧酶實驗培養(yang) 基規格:BR5g詳情介紹
TSA表麵接觸皿(6.5cm)規格:10個(ge) /包用途:用於(yu) 環境、器皿、設備和表麵的無菌檢測
月桂基硫鹽胰蛋白腖肉湯(LST)顆粒規格:300ml/袋*10用途:用於(yu) 大腸菌群,大腸杆菌的測定(GB、SN標準)
波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑規格:2ml/支*5用途:每支添加於(yu) 225ml中HB0273中
柯氏尿素瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 細菌脲酶檢測
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。