細胞名稱 恒河猴肺細胞;RM-L1
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雄性獼猴的肺組織。1985年中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yang) 條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS
傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次
傳(chuan) 代情況: P4
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
恒河猴肺細胞;RM-L1 | 貼壁生長 | EY-X63745 |
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
Quercetin 4'-O-galactoside
CAS No.:381728-34-3
中文名:槲皮素-4'-O-半乳糖苷
分子式:C21H20O12
(±)原蘇木素B 訂購|谘詢 普列克底物蛋白(PLEK) 規格: 20mg
柴胡皂苷a 訂購|谘詢 普列克底物蛋白2(PLEK2) 規格: 20mg
醋 訂購|谘詢 普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2(PHLDA2) 規格: 50mg
絞股藍 訂購|谘詢 糞卟啉原氧酶(CPOX) 規格: 2g
兒(er) 茶 訂購|谘詢 濕結合蛋白(RTBDN) 規格: 0.5g
石見穿 訂購|谘詢 滑行蛋白α(TXLNα) 規格: 10g
柴胡 訂購|谘詢 滑行蛋白β(TXLNβ) 規格: 0.5g
對羥基酯 訂購|谘詢 滑行蛋白γ(TXLNγ) 規格: 100mg
戰骨 訂購|谘詢 遊離三狀腺原(fT3) 規格: 8g
環維黃楊星D 訂購|谘詢 遊離狀腺素(fT4) 規格: 20mg
冬淩草素 訂購|谘詢 遊離脂肪受體(ti) 1(FFAR1) 規格: 20mg
伐昔洛韋 訂購|谘詢 滋養(yang) 層特異性糖蛋白(TPBG) 規格: 100mg
異槲皮苷 訂購|谘詢 富酪蛋白(STATH) 規格: 20mg
石杉 訂購|谘詢 窖蛋白(CAV1) 規格: 50mg
賽門苷I 訂購|谘詢 窖蛋白(CAV1) 規格: HPLC≥98%,20mg/支;
老鸛草素 訂購|谘詢 窖蛋白(CAV1) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
歐夾竹桃苷 訂購|谘詢 窖蛋白(CAV1) 規格: HPLC≥98%;5mg/支
川楝素 訂購|谘詢 窖蛋白(CAV1) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
ALS2CR8 肌側(ce) 索硬2染色體(ti) 區域候選蛋白8抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233)
Corin 心髒特異性絲(si) 蛋白酶抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Dextrin
GPR55 蛋白偶聯受體(ti) 55抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Benzidamine HCl
LAP3 亮基肽酶3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Sephadex G50
LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生長促進因子抗體(ti) (激肽原1) 現貨供應 0.2ml Sephadex G50
KMB1/Maxi Potassium channel beta 鈣激活通道蛋白β1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml (S)(+)Mandelic acid
P2RX4 三腺苷門控陽離子通道蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml (R)(−)Mandelic acid
ATP6IP2 ATP酶H+轉運溶酶體(ti) 輔助蛋白2抗體(ti) 現貨供應 0.2ml 1Aminohydantoin Hydrochloride
正辛基穀 進口、國產(chan) 英文名稱:OGP 含量:精製級,150000000u/g
正辛 進口、國產(chan) 英文名稱:SodiumCaprylate 含量:AR,90%
正已 進口、國產(chan) 英文名稱:Hexanoicacid 含量:BR,85%
芝加哥天藍6B 進口、國產(chan) 英文名稱:Chicagoskyblue6B 含量:BS,85%
脂多糖 進口、國產(chan) 英文名稱:LPS 含量:高純,98%
脂肪水解酶 進口、國產(chan) 英文名稱:Lipase(Candida) 含量:BR,類型F00,130u/mg
脂蠟 進口、國產(chan) 英文名稱:StearicAcid 含量:CP,98.5%
脂壁 進口、國產(chan) 英文名稱:Lipoteichoicacid 含量:CP,99%
脂酶 進口、國產(chan) 英文名稱:Lipase(pocinepancreas) 含量:生物技術級,0.5u/mg
脂質體(ti) 2000 進口、國產(chan) 英文名稱:Lipofectamine2000TransfectionReagent 含量:AR,99%
恒河猴肺細胞;RM-L1肉湯基礎規格:250g用途:用於(yu) 蠟樣芽孢杆菌的試驗
李斯特氏菌顯色培養(yang) 基規格:1000ml用途:用於(yu) 李斯特氏菌的顯色培養(yang) ,單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環
孟加拉紅培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 食品中黴菌及酵母菌總數測定
精氨肉湯規格:250g用途:用於(yu) 遊泳池中假單胞菌檢測
胰酪腖大豆多粘菌素肉湯基礎(GB)規格:(2.25萬(wan) 單位)用途:2.25萬(wan) 單位
纖維二糖-(CC)瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 弧菌的分離培養(yang)