產(chan) 品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體(ti) 係中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個(ge) PCR進程,使每個(ge) 循環變得“可見”。本產(chan) 品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為(wei) 基礎開發的專(zhuan) 門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chan) 品名稱 | 規格 | 貨號 |
兔源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9563 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為(wei) 12個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chu) 存條件:-20℃避光保存,避免反複凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶隻需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們(men) 提取RNA,設計並合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及後續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀(yi) 器及分析報告
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei) 例)。由於(yu) 標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬(wan) 不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)。為(wei) 增加產(chan) 品穩定性和避免擴散傳(chuan) 染性病原,本產(chan) 品不提供活體(ti) 樣品做陽性對照,隻提供無傳(chuan) 染性的 DNA 段作為(wei) 陽性對照。
1. 標記 6 個(ge) 離心管,分別為(wei) 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鍾,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鍾,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鍾,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重複上麵的操作直到得到 6 個(ge) 稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的製備
7. 如果有N個(ge) 樣品,設置N+2個(ge) 提取,多出的一個(ge) 是PC(樣品製備陽性對照),一個(ge) 是 NC(樣品製備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體(ti) 積跟每次製備要求的體(ti) 積一樣,以此作為(wei) PC。另外用水作為(wei) NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為(wei) RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體(ti) 係,在樣品製備室進行)
9. 如果做定量分析並且隻做1次重複,則標記N+9個(ge) PCR 管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的 N+2個(ge) 樣品,1個(ge) 用於(yu) PCR陰性對照(用水做模板),6個(ge) 用於(yu) 標準曲線。如果做定性分析,並且隻做1次重複,則標記N+4 個(ge) PCR管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的N+2個(ge) 樣品,1 個(ge) 用於(yu) PCR 陰性對照(用水做模板),1個(ge) 用於(yu) PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下麵隻以定量分析為(wei) 例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表隻列出一次重複。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照,並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chu) 存好後加)
RS結構域衍生肽溴磷 分析標準品Human TARSL2 ELISA Kit
診斷S6激酶底物,S6(231-239)V 分析標準品Human TAF1L ELISA Kit
RSV M (187 - 195)氯化苯基汞 分析標準品Human TAF1 ELISA Kit
S-I-G-S-L-A-K腐黴利 分析標準品Human TAF3 ELISA Kit
S-F-L-L-R二氯鹽 分析標準品Human TAF6L ELISA Kit
S6-1除蟲菊酯 分析標準品Human TAF5L ELISA Kit
SALMF 酰 1 (S1)戊炔草 分析標準品Human TBCD ELISA Kit
SALMF 酰 2 (S2)4-氯聯苯 分析標準品Human TAF7 ELISA Kit
Salusin-α矽酮OV-1 GCHuman MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit
Salusin- β矽酮 DC-550 GCHuman TASP1 ELISA Kit
SAMs肽磺醋酰 分析標準品Human TARSL2 ELISA Kit
激活蛋白C12磺氯吡 分析標準品Human TARS2 ELISA Kit
激活蛋白C18磺吡啶 分析標準品Human TAX1BP1 ELISA Kit
激活蛋白C22西瑪津 分析標準品Human TAX1BP3 ELISA Kit
角蝰素 6c 噻苯隆 分析標準品Human TBC1D17 ELISA Kit
兔源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒吡哆磷酸磷酸酶(PDXP)(酶聯免疫吸附試驗法)石油(AR,bp 90-120 °C) 質量規格:1/60mol/L(0.1N)
異戊烯半氧化酶1(PCYOX1)(酶聯免疫吸附試驗法)1,1,2-三氯三氟乙烷(CFC-113)(99.5%) 質量規格:AR
酮酸羧化酶(PC)(酶聯免疫吸附試驗法)1,1,2-三氯三氟乙烷(CFC-113)(99.5%) 質量規格:指示劑級
Polybromo 1蛋白(PBRM1)(酶聯免疫吸附試驗法)滑石粉(800目) 質量規格:分析標準品,99.96%
小細胞蛋白γ(PARVγ)(酶聯免疫吸附試驗法)滑石粉(800目) 質量規格:IND
小細胞蛋白β(PARVβ)(酶聯免疫吸附試驗法)滑石粉(800目) 質量規格:ACS reagent,95 %
小細胞蛋白α(PARVα)(酶聯免疫吸附試驗法)滑石粉(藥用級,325目) 質量規格:AR
Papilin蛋白(PAPLN)(酶聯免疫吸附試驗法)滑石粉(藥用級,325目) 質量規格:>98%