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星空体育官网站   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>小鼠肺成纖維細胞;WML2
 
產品名稱:
小鼠肺成纖維細胞;WML2
產品型號:
產品報價:
產品特點:
小鼠肺成纖維細胞;WML2相關產品:SDS-PAGE蛋白質低分子量標準品牌
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  小鼠肺成纖維細胞;WML2的詳細資料:

公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:

產(chan) 品名稱

生長特性

貨號

小鼠肺成纖維細胞;WML2

貼壁生長

EY-X63752

細胞名稱  小鼠肺成纖維細胞;WML2
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雄性小鼠的肺組織。1985年中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次

傳(chuan) 代情況: P6

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)

冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Tricin 7-O-glucoside

CAS No.:32769-01-0

中文名:苜蓿素-7-O-葡萄糖苷

分子式:C23H24O12

三七皂苷R1 訂購|谘詢  跨膜蛋白27(TMEM27) 規格: 20mg

聖草次苷 訂購|谘詢  跨膜蛋白27(TMEM27) 規格: 20mg

1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購|谘詢  跨膜蛋白27(TMEM27) 規格: 10mg

熊去氧膽 訂購|谘詢  跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L) 規格: 20mg

新芒果苷 訂購|谘詢  跨膜蛋白5(TMEM5) 規格: 20mg

鄰氧基桂 訂購|谘詢  蝸管蛋白(COIL) 規格: 20mg

基蓮心 訂購|谘詢  嗅素1(OLFM1) 規格: 20mg

葒草苷 訂購|谘詢  嗅素2(OLFM2) 規格: 20mg

厚樸 訂購|谘詢  嗅素3(OLFM3) 規格: 20mg

異佛手柑內(nei) 酯 訂購|谘詢  嗅素4(OLFM4) 規格: 20mg

隱綠原 訂購|谘詢  嗅素4(OLFM4) 規格: 20mg

豆甾(95%) 訂購|谘詢  嗅素4(OLFM4) 規格: 20mg

香葉木素 訂購|谘詢  嗅蛋白(Olfactorin) 規格: 20mg

華基(97%) 訂購|谘詢  錨定蛋白重複域蛋白1(ANKRD1) 規格: 20mg

長春瑞濱 訂購|谘詢  錨定蛋白重複域蛋白1(ANKRD1) 規格: 20mg

蒼術素 訂購|谘詢  錨定蛋白重複域蛋白1(ANKRD1) 規格: 20mg

白花前胡素 訂購|谘詢  錫蛋白(SNN) 規格: 20mg

補骨脂二氫黃 訂購|谘詢  催產(chan) 素(OT) 規格: 20mg

WAPL  EBV核蛋白2抗體(ti)    現貨供應 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate

CAPD3/hCAPD3  濃縮素2複合亞(ya) 基D3抗體(ti)    現貨供應 0.2ml dATP 100 mM solution

AMSH  信號轉導銜接結合蛋白抗體(ti)    現貨供應 0.2ml Sodium decanoate

ASB3  錨蛋白重複序列細胞因子信號抑製物盒蛋白家族3抗體(ti)    現貨供應 0.2ml Agarose

EIF2C1/Ago1  真核翻譯起始因子2C1抗體(ti)    現貨供應 0.2ml Agarose

Anillin  胞環蛋白肌動蛋白結合蛋白抗體(ti)    現貨供應 0.2ml Phytohemagglutinin

BIN3  細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體(ti)    現貨供應 0.2ml Kinetin,6Furfurylaminopurine

CCDC11  卷曲螺旋結構域蛋白11抗體(ti)    現貨供應 0.2ml EGTA, egtazic acid

紅相關(guan) 物質N標準品  規格:50mg  英文名稱:

吡嗪酰標準品  規格:200mg  英文名稱:Pyrazinamide

()表沒食子兒(er) 茶素沒食子酯標準品  規格:20mg  英文名稱:

煙酰標準品  規格:500mg  英文名稱:Niacinamide (Vitamin B3)

異標準品  規格:1.2ml×3ampules  英文名稱:Cumene

曲三矽相關(guan) 物質B標準品  規格:25mg  英文名稱:

醋標準品  規格:500mg  英文名稱:Betamethasone Acetate

阿散標準品  規格:25mg  英文名稱:Arsanilic Acid

琥珀美爾標準品  規格:200mg  英文名稱:Metoprolol Succinate

非那雄標準品  規格:200mg  英文名稱:Finasteride
小鼠肺成纖維細胞;WML2棉子糖-雙岐杆菌鑒定規格:20支詳情介紹

牛津瓊脂(OXA)平板(9cm)規格:10個(ge) /包用途:用於(yu) 單增李氏菌的選擇性分離

無氮培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 自生固氮菌和鉀細菌的培養(yang)

輔酶I(NDA)規格:1g用途:進口

匹克氏肉湯基礎A規格:100g用途:用於(yu) 溶血性鏈球菌的增菌培養(yang) ,需添加脫纖維羊血(GB標準)

SIM動力培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 動力試驗
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。

 

產品相關關鍵字: 小鼠肺成纖維細胞 WML2
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