大鼠原代子宮內(nei) 膜上皮原代細胞

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：大鼠

組織來源：子宮子宮

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產(chan) 品貨期：2-3周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:大鼠子宮內(nei) 膜上皮細胞采用先膠原酶消化、後組織貼塊法，結合上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10⁵cells/瓶。大鼠子宮內(nei) 膜上皮細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒(er) 的器官，位於(yu) 盆腔中部，膀胱與(yu) 直腸之間，其位置可隨膀胱與(yu) 直腸的充盈程度或體(ti) 位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(hui) 陰中心腱等結構維持，這些結構受損或鬆弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nei) 膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結締組織構成，其內(nei) 有大量的星形細胞，稱為(wei) 基質細胞）組成，子宮內(nei) 膜可分為(wei) 淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nei) 膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nei) 膜上皮細胞主要功能：①子宮內(nei) 膜亦稱子宮黏膜，是指構成哺乳類子宮內(nei) 壁的一層；②子宮內(nei) 膜對動情素和孕激素都起反應，因此可隨著性周期（發情周期、月經周期）發生顯著的變化。子宮內(nei) 膜與(yu) 胚胎附植密切相關(guan) ，在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與(yu) 母體(ti) “對話"的過程中，子宮內(nei) 膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內(nei) 膜構成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nei) 層，位於(yu) 子宮腔麵，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nei) 膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nei) 膜的再生修複是子宮的重要生理功能。體(ti) 外培養(yang) 的子宮內(nei) 膜上皮細胞對於(yu) 研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義(yi) 。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

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