運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為(wei) 12個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chu) 存條件:-20℃避光保存,避免反複凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶隻需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們(men) 提取RNA,設計並合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及後續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀(yi) 器及分析報告
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
伊氏李斯特菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Listeria ivanovii | EY00P9073 |
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei) 例)。由於(yu) 標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬(wan) 不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)。為(wei) 增加產(chan) 品穩定性和避免擴散傳(chuan) 染性病原,本產(chan) 品不提供活體(ti) 樣品做陽性對照,隻提供無傳(chuan) 染性的 DNA 段作為(wei) 陽性對照。
1. 標記 6 個(ge) 離心管,分別為(wei) 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鍾,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鍾,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鍾,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重複上麵的操作直到得到 6 個(ge) 稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的製備
7. 如果有N個(ge) 樣品,設置N+2個(ge) 提取,多出的一個(ge) 是PC(樣品製備陽性對照),一個(ge) 是 NC(樣品製備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體(ti) 積跟每次製備要求的體(ti) 積一樣,以此作為(wei) PC。另外用水作為(wei) NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為(wei) RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體(ti) 係,在樣品製備室進行)
9. 如果做定量分析並且隻做1次重複,則標記N+9個(ge) PCR 管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的 N+2個(ge) 樣品,1個(ge) 用於(yu) PCR陰性對照(用水做模板),6個(ge) 用於(yu) 標準曲線。如果做定性分析,並且隻做1次重複,則標記N+4 個(ge) PCR管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的N+2個(ge) 樣品,1 個(ge) 用於(yu) PCR 陰性對照(用水做模板),1個(ge) 用於(yu) PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下麵隻以定量分析為(wei) 例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表隻列出一次重複。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照,並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chu) 存好後加)
產(chan) 品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體(ti) 係中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個(ge) PCR進程,使每個(ge) 循環變得“可見”。本產(chan) 品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為(wei) 基礎開發的專(zhuan) 門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五人參皂苷Rb3(標準品) Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione
萘啶酮酸;人參皂苷Rc(標準品) Dibenz[a,h]anthracene
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元人參皂苷Rd(標準品) Dibenzo[b,def]chrysene
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元人參皂苷Rd2(標準品) 1,2:8,9-Dibenzopentacene
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元人參皂苷Re(標準品) Dibenzo[g,p]chrysene
溴化乙錠(EB)人參皂苷Rf(標準品) Isoviolanthrone
溴化乙錠(EB)人參皂苷Rg1(標準品) 2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
貝西沙星鹽酸鹽人參皂苷Rg2(標準品) Naphtho[2,3-a]pyrene
貝西沙星鹽酸鹽人參皂苷Rh1(標準品) 2-Chlorophenothiazine
貝西沙星鹽酸鹽人參皂苷Rh3(標準品) 2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
甜菜堿(標準品)人參皂苷Rh7(標準品) Indanthrone
甜菜堿人參皂苷Rh8(標準品) Julolidine
甜菜堿人參皂苷Rk1(標準品) 9-Julolidinecarboxaldehyde
尿酸人參皂苷Rk2(標準品) 9,10-Phenanthrenequinone
尿酸人參皂苷RK3(標準品) Phenanthridine
伊氏李斯特菌探針法PCR熒光定量試劑盒基質金屬蛋白酶13(MMP13)(酶聯免疫吸附試驗法)達比加群 質量規格:HPLC≥98%,標準品 500ML
基質金屬蛋白酶13(MMP13)(酶聯免疫吸附試驗法)達比加群 質量規格:>98,BR500ML
基質金屬蛋白酶13(MMP13)(酶聯免疫吸附試驗法)達比加群 質量規格:>98%,BR500ML
D-二聚體(ti) (D2D)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:>98%,BR500ML
血小板反應蛋白(THBS1)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:>98%,BR500ML
簇集蛋白(CLU)(酶聯免疫吸附試驗法)(標準品) 質量規格:HPLC含量測定500ML
成纖維細胞生長因子受體(ti) 1(FGFR1)(酶聯免疫吸附試驗法)D-阿拉伯糖 質量規格:>99%500ML
血管內(nei) 皮生長因子受體(ti) 3(VEGFR3)(酶聯免疫吸附試驗法)D-阿拉伯糖 質量規格:HPLC≥98%,標準品500ML
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售後服務。
產(chan) 品名稱 | 不動杆菌屬通用探針法PCR熒光定量試劑盒 |
英文名稱 | Acinetobacter spp. |
貨號 | EY00P8637 |
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶隻需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經過優(you) 化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便於(yu) 區分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據高度保守區設計,不會(hui) 跟其他病毒的RNA發生交叉反應。
5. 本產(chan) 品足夠 50 次 20μL 體(ti) 係的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chan) 品隻能用於(yu) 科研。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀(yi) 有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀(yi) 上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
熒光定量PCR服務:
公司推出,該技術不僅(jin) 實現了PCR從(cong) 定性到定量的飛躍,而且與(yu) 常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決(jue) PCR汙染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用於(yu) 檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA幹擾的實驗結果等。我公司為(wei) 您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀(yi) 器。
1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大於(yu) 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大於(yu) 5 ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長基因序列。
(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與(yu) 合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成後,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。
2-甲氧基-6-羧酸甲酯吡三聚GC-MS分析試劑盒 MELAMINE GC-MS ANALYSIS KIT(P) Canertinib 2HCl
2-甲基-7-氮雜吲哚三聚相關(guan) 類似物標準品試劑盒 MELAMINE RELATED ANALOGS STANDARDS KIT(P) Capecitabine
4-(二氟溴甲基)溴苯山竹果標準品試劑盒 MANGOSTEEN STANDARDS KIT(P) Capecitabine
N-甲基四氫-2H-吡喃-4-山竹果標準品試劑盒 MANGOSTEEN STANDARDS KIT(P) Capreomycin Sulfate
2-溴-3',5'-二氟苯乙酮山竹果標準品試劑盒 MANGOSTEEN STANDARDS KIT(P) Capreomycin Sulfate
1-苄基呱啶-2-羧酸木蘭(lan) 亞(ya) 屬標準品試劑盒 MAGNOLIA STANDARDS KIT(P) Carisoprodol
吡啶並[3,4-D]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮瑪卡標準品試劑盒 MACA STANDARDS KIT(RG) Carisoprodol
5-氨基-4-氮雜吲哚地衣酸標準品試劑盒 LICHEN ACID STANDARDS KIT(RG) Carvedilol
1-Boc-2-羥甲基呱洋地黃毛花苷標準品試劑盒 DIGITALIS LANATOSIDE STANDARDS KIT(RG) Carvedilol
1H-1,2,3-三氮唑-4-鹽酸鹽葛藤類黃酮標準品試劑盒 KUDZU FLAVONOID STANDARDS KIT(P) Cediranib
咪唑[1,2-a]吡啶-2-葛藤類黃酮標準品試劑盒 KUDZU FLAVONOID STANDARDS KIT(P) Celecoxib
5-羥基-3-甲基吲哚醉椒標準品試劑盒 KAVA STANDARDS KIT(P) Celecoxib
康力龍醉椒標準品試劑盒 KAVA STANDARDS KIT(P) Chlortetracycline HCl
2-氯-4-氯甲基吡啶黃連標準品試劑盒 KATUKA (PICRORHIZA KURROA) STANDARDS KIT(SH) Chlortetracycline HCl
4-溴-2-氟苯鹽酸鹽黃連標準品試劑盒 KATUKA (PICRORHIZA KURROA) STANDARDS KIT(SH) Cilostazol
不動杆菌屬通用探針法PCR熒光定量試劑盒睫狀神經營養(yang) 因子(CNTF)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸金剛烷 質量規格:HPLC>98%,標準品100mL
血管內(nei) 皮細胞蛋白C受體(ti) (PROCR)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸金剛烷 質量規格:純度>98%,BR,可用於(yu) 細胞培養(yang) 100mL
α2-纖溶酶抑製因子(α2PI)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸金剛烷 質量規格:HPLC≥98%,標準品100mL
血管內(nei) 皮細胞蛋白C受體(ti) (PROCR)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸金剛烷(標準品) 質量規格:945-1030 ug /mg,二水物100mL
內(nei) 分泌腺來源血管內(nei) 皮生長因子(EG-VEGF)(酶聯免疫吸附試驗法)硫酸,硫酸丁 質量規格:效價(jia) 測定100mL
嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)(酶聯免疫吸附試驗法)硫酸,硫酸丁 質量規格:> 95%,BR100mL
嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)(酶聯免疫吸附試驗法)硫酸,硫酸丁 質量規格:HPLC>95%,標準品100mL
趨化因子C-C-基元配體(ti) 3樣蛋白1(CCL3L1)(酶聯免疫吸附試驗法)硫酸(標準品) 質量規格:純度> 98%,BR,可用於(yu) 細胞培養(yang) 100ml