公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚肺二倍體(ti) 細胞;HEL-2 | 貼壁生長 | EY-X63739 |
細胞名稱 胚肺二倍體(ti) 細胞;HEL-2
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一女性胚胎的肺組織。1986年中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次
傳(chuan) 代情況: P17
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Luteolin 5,3'-dimethyl ether
CAS No.:62346-14-9
中文名:木犀草素-5,3'-二甲醚
分子式:C17H14O6
纈草三酯 訂購|谘詢 葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP) 規格: 20mg
吳茱萸 訂購|谘詢 葡萄糖變位酶(PGM2) 規格: 20mg
麝香草 訂購|谘詢 葡萄糖變位酶1(PGM1) 規格: 20mg
升3OL阿拉伯糖苷 訂購|谘詢 葡萄糖變位酶2樣蛋白1(PGM2L1) 規格: 20mg
芹菜素7OβD葡萄糖苷 訂購|谘詢 葡萄糖變位酶3(PGM3) 規格: 10mg
豬去氧膽 訂購|谘詢 葡萄糖變位酶5(PGM5) 規格: 20mg
芒果苷 訂購|谘詢 葡糖激酶(GNTK) 規格: 20mg
金石蠶苷 訂購|谘詢 棕櫚酰膜蛋白2(MPP2) 規格: 20mg
蓮心高 訂購|谘詢 棕櫚酰膜蛋白2(MPP2) 規格: 20mg
荷葉 訂購|谘詢 棕櫚酰膜蛋白5(MPP5) 規格: 20mg
橄欖苦苷 訂購|谘詢 棕櫚酰膜蛋白6(MPP6) 規格: 20mg
佛手柑內(nei) 酯 訂購|谘詢 棕櫚酰膜蛋白6(MPP6) 規格: 20mg
新綠原 訂購|谘詢 棕櫚酰膜蛋白6(MPP6) 規格: 20mg
膽固 訂購|谘詢 棘皮動物微管關(guan) 聯蛋白樣蛋白2(EML2) 規格: 20mg
訂購|谘詢 棘皮動物微管關(guan) 聯蛋白樣蛋白2(EML2) 規格: 20mg
蟾它靈 訂購|谘詢 硬纖毛蛋白(STRC) 規格: 10mg
文多靈 訂購|谘詢 硬骨素(SOST) 規格: 20mg
白術內(nei) 酯III 訂購|谘詢 硬骨素(SOST) 規格: 20mg
PARL 骨骼肌細胞線粒體(ti) 膜蛋白PARL抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Pheniramine Maleate
GYPB/CD235b 血型糖蛋白δ抗體(ti) 現貨供應 0.2ml FTase Substrate, Fluorogenic
FUT1 岩藻糖轉移酶1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Linaclotide
ICAM4/CD242 細胞間粘附分子4抗體(ti) 現貨供應 0.2ml benzoylpaeoniflorin
RHCG RH血型C糖蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml 3,4,5Tricaffeoylquinic acid
SLC14A1/RACH1 尿素轉運型糖蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Alisol A 24acetate
XKR1 膜轉運蛋白XK抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Alisol C monoacetate
ACSM3 酰基合成酶3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Sclareolide
油丁酯 進口、國產(chan) 英文名稱:Butyloleate 含量:AR,98%
鈾試劑III 進口、國產(chan) 英文名稱:ArsenazoIII 含量:BR,96%
有機矽消泡劑 進口、國產(chan) 英文名稱:Siliconedefoamer 含量:AR,99%
有水鐵 進口、國產(chan) 英文名稱:Ferrichydroxide 含量:2.7N,99.7%
有效 進口、國產(chan) 英文名稱:Validamycin 含量:BR,豬腸胃
莠去津 進口、國產(chan) 英文名稱:Atrazine 含量:超純,100mM
右旋甘 進口、國產(chan) 英文名稱:LPhenylglycine 含量:BR,99%
右旋泛 進口、國產(chan) 英文名稱:SodiumDpantothenate 含量:CP,97.5%
右旋酒石 進口、國產(chan) 英文名稱:DTartaricacid 含量:AR,99.5%
右旋脯甲酯氫物 進口、國產(chan) 英文名稱:DProlinemethylesterhydrochloride 含量:BR,98%
胚肺二倍體(ti) 細胞;HEL-2酵母浸出物葡萄糖瓊脂培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 乳和乳製品中酵母菌和黴菌的計數
哥倫(lun) 比亞(ya) 血瓊脂基礎規格:BR250g用途:營養(yang) 非常豐(feng) 富,用於(yu) 各種細菌的基礎培養(yang) 基
10%化鈉胰蛋白腖大豆肉湯規格:10ml*20支/包用途:用於(yu) 金黃色葡萄球菌的MPN測定及增菌培養(yang)
木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 藥品或生物製品中沙門氏菌選擇分離培養(yang)
百裏香酚蘭(lan) 規格:25g用途:微生物指示劑
緩衝(chong) 蛋白腖水(BPW)規格:250g用途:用於(yu) 配製腸球菌檢測用稀釋液
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。