公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚胎幹細胞;HES3.3 | 貼壁生長 | EY-X63705 |
細胞名稱 胚胎幹細胞;HES3.3
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,3-4天傳(chuan) 1次
傳(chuan) 代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Ajmalicine
CAS No.:483-04-5
中文名:阿嗎
分子式:C21H24N2O3
廣天仙子 訂購|谘詢 煙受體(ti) 1(NIACR1) 規格: 1g
N異基去酯 訂購|谘詢 煙酰腺嘌呤二核苷(NAADP) 規格: 50mg
紫荊皮 訂購|谘詢 型膽受體(ti) α1(CHRNα1) 規格: 0.5g
檀香 訂購|谘詢 型膽受體(ti) α1(CHRNα1) 規格: 1g
土荊皮(金錢鬆) 訂購|谘詢 型膽受體(ti) α2(CHRNα2) 規格: 1g
訂購|谘詢 型膽受體(ti) α3(CHRNα3) 規格: 100mg
板栗殼 訂購|谘詢 型膽受體(ti) α4(CHRNα4) 規格: 0.5g
賴諾普利 訂購|谘詢 型膽受體(ti) α5(CHRNα5) 規格: 100mg
卡地平 訂購|谘詢 型膽受體(ti) α7(CHRNα7) 規格: 100mg
訂購|谘詢 型膽受體(ti) β1(CHRNβ1) 規格: 100mg
小豆蔻明 訂購|谘詢 型膽受體(ti) β2(CHRNβ2) 規格: 20mg
鄰磺酰 訂購|谘詢 型膽受體(ti) β3(CHRNβ3) 規格: 100mg
醋 訂購|谘詢 海馬鈣蛋白(HPCA) 規格: 50mg
槐米 訂購|谘詢 海藻糖酶(TREH) 規格: 2g
侖(lun) 訂購|谘詢 海藻糖酶(TREH) 規格: 100mg
桂枝 訂購|谘詢 家族性地中海熱基因(MEFV) 規格: 0.5g
酰人生長激素 訂購|谘詢 調節激活正常T細胞表達分泌因子(RANTES) 規格: 2mg
莫司汀 訂購|谘詢 調節激活正常T細胞表達分泌因子(RANTES) 規格: 100mg
Plastin L 淋巴細胞胞漿蛋白LCP1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Maraviroc
RASD2/Tumor endothelial marker 2 腫瘤血管內(nei) 皮標記蛋白2抗體(ti) 現貨供應 0.2ml RevalorH Trenbolone acetate
RNF43 環指蛋白43抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Silibinin
RPLP2 性核糖體(ti) 蛋白P2抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Silibinin
SART3 T淋巴細胞識別的鱗狀細胞癌SART3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Ezetimibe
SDCCAG10 結腸癌抗原10抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Ezetimibe
SDCCAG8 結腸癌抗原8抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Mepivacaine HCl
SPANX 腫瘤/抗原11.3抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Amprenavir
維生素H 進口、國產(chan) 英文名稱:DBiotin 含量:IND
維生素12 進口、國產(chan) 英文名稱:VB12 含量:AR,75%
胃液素 進口、國產(chan) 英文名稱:Pepsin(porcinestomachmucose) 含量:生物技術級,300u/mg
蝸牛酶 進口、國產(chan) 英文名稱:Snailase 含量:BR,300u/mg,懸浮液
蝸牛凝集素 進口、國產(chan) 英文名稱:Snailagglutinin 含量:BR,Ⅰ型,>125CDU/mg
沃來西脫藍B 進口、國產(chan) 英文名稱:OracetblueB 含量:BS
烏(wu) 美司 進口、國產(chan) 英文名稱:Bestatin 含量:USP級,95%,900mcg/mg
鎢矽 進口、國產(chan) 英文名稱:Silicotungsticacidhydrate 含量:AR,86.5%
鎢 進口、國產(chan) 英文名稱:Tungsten 含量:AR,99.7%
鎢鉀 進口、國產(chan) 英文名稱:Potassiumtungstate 含量:AR,95%
胚胎幹細胞;HES3.3營養(yang) 瓊脂斜麵規格:250g用途:用於(yu) 細菌的純化培養(yang)
WS 瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 沙門氏菌的選擇性分離(GB標準)
曙紅瓊脂培養(yang) 基規格:BR250g詳情介紹
knudson C 培養(yang) 基規格:用途:用於(yu) 蘭(lan) 花組織培養(yang)
鬆三糖規格:1g用途:微生物指示劑
平板計數瓊脂(PCA)規格:250g用途:標準平板計數瓊脂,含糖,用於(yu) 細菌總數的測定(GB、SN標準)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。