產(chan) 品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體(ti) 係中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個(ge) PCR進程,使每個(ge) 循環變得“可見”。本產(chan) 品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為(wei) 基礎開發的專(zhuan) 門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
索氏梭狀芽孢杆菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Clostridium sordellii | EY00P8833 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為(wei) 12個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chu) 存條件:-20℃避光保存,避免反複凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶隻需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們(men) 提取RNA,設計並合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及後續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀(yi) 器及分析報告
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei) 例)。由於(yu) 標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬(wan) 不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)。為(wei) 增加產(chan) 品穩定性和避免擴散傳(chuan) 染性病原,本產(chan) 品不提供活體(ti) 樣品做陽性對照,隻提供無傳(chuan) 染性的 DNA 段作為(wei) 陽性對照。
1. 標記 6 個(ge) 離心管,分別為(wei) 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鍾,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鍾,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鍾,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重複上麵的操作直到得到 6 個(ge) 稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的製備
7. 如果有N個(ge) 樣品,設置N+2個(ge) 提取,多出的一個(ge) 是PC(樣品製備陽性對照),一個(ge) 是 NC(樣品製備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體(ti) 積跟每次製備要求的體(ti) 積一樣,以此作為(wei) PC。另外用水作為(wei) NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為(wei) RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體(ti) 係,在樣品製備室進行)
9. 如果做定量分析並且隻做1次重複,則標記N+9個(ge) PCR 管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的 N+2個(ge) 樣品,1個(ge) 用於(yu) PCR陰性對照(用水做模板),6個(ge) 用於(yu) 標準曲線。如果做定性分析,並且隻做1次重複,則標記N+4 個(ge) PCR管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的N+2個(ge) 樣品,1 個(ge) 用於(yu) PCR 陰性對照(用水做模板),1個(ge) 用於(yu) PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下麵隻以定量分析為(wei) 例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表隻列出一次重複。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照,並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chu) 存好後加)
鹽酸甲苯噻TTC瓊脂基礎/三苯四唑瓊脂基礎/氯化三苯四氮瓊脂基礎/紅四氮唑瓊脂基礎/三苯基氯化四氮唑瓊脂基礎/TTC Agar Base Isoluminol
位十二內(nei) 酯TTC營養(yang) 瓊脂/三苯四唑營養(yang) 瓊脂/氯化三苯四氮營養(yang) 瓊脂/紅四氮唑營養(yang) 瓊脂/三苯基氯化四氮唑營養(yang) 瓊脂/TCC Nutrient Agar Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate
特布他林半硫酸鹽TTC*吐溫80營養(yang) 瓊脂/三苯四唑*吐溫80營養(yang) 瓊脂/氯化三苯四氮*吐溫80營養(yang) 瓊脂/紅四氮唑*吐溫80營養(yang) 瓊脂/三苯基氯化四氮唑*吐溫80營養(yang) 瓊脂/TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar Disodium 8-Ami,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate
4-溴-3-氯苯HC瓊脂基礎/HC Agar Base Coumarin 102
2,3-二氯-6-氟苯甲改良LETHEEN瓊脂基礎/LETHEEN Agar Base Modified Coumarin 314
苯並(k)熒蒽TAT肉湯/胰蛋白腖大豆*聚山梨酸酯瓊脂/*大豆*聚山梨酸酯瓊脂/胰酪腖大豆*聚山梨酸酯瓊脂/TAT Broth Fluorescein Chloride
苯並(b)螢蒽*培養(yang) 基/Glycine Medium 2',7'-Dichlorofluorescein
R-3-甲基嗎啉鹽酸鹽快速硫化氫試驗瓊脂/H2S Test Medium 2,3-Diaminonaphthalene
*鹽酸鹽DNA酶甲基綠瓊脂基礎/脫氧核糖核酸酶甲基綠瓊脂基礎/Dnase Agar Base With Methyl Green Dimidium Bromide
苯並[g,h,i]芘波爾頓選擇性增菌肉湯/波爾頓肉湯/Bolton Selective Enrichment Broth 7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin
沙丁CCDA基礎/彎曲杆菌培養(yang) 基基礎/炭*脫氧膽酸鹽瓊脂基礎/CCDA Base 7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin
N-叔丁基-2-苯並噻唑次磺酰Campy-Cefex瓊脂基礎/Campy-Cefex Agar Base 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid
羥呱LB肉湯/LB Broth Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate
十一酸甲酯LB瓊脂/LB Agar Uranine K
壬酸甲酯LB-Top Agar Fluorescein Diacetate
索氏梭狀芽孢杆菌探針法PCR熒光定量試劑盒抑瘤素M受體(ti) (OSMR)(酶聯免疫吸附試驗法)甲磺酸* 質量規格:HPLC≥97%,BR1ml(500X)
抑製素βB(INHβB)(酶聯免疫吸附試驗法)甲磺酸*(標準品) 質量規格:HPLC≥98%,標準品6次/盒
細胞色素b-561(CYB561)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸* 質量規格:HPLC≥95%,BR3×1ml
主要穹窿蛋白(MVP)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸* 質量規格:HPLC≥98%,BR1ml(500X)
鈣腔蛋白(CALU)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸* 質量規格:HPLC≥98%,標準品6次/盒
*α(Amyα)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸*(標準品) 質量規格:≥98%,BR100ml
白介素2受體(ti) α(IL2Rα)(酶聯免疫吸附試驗法)* 質量規格:HPLC≥98%,標準品6次/盒
蕈堿型*受體(ti) M3(CHRM3)(酶聯免疫吸附試驗法)* 質量規格:>98%,可溶性鳥苷酸環化酶激 (sGC)活劑3×1ml