公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
發綠色熒光的小鼠胚胎幹細胞;G1 | 貼壁生長 | EY-X63714 |
細胞名稱 發綠色熒光的小鼠胚胎幹細胞;G1
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,3-4天傳(chuan) 1次
傳(chuan) 代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Gelsevirine
CAS No.:38990-03-3
中文名:鉤吻綠
分子式:C21H24N2O3
蘆薈苷 訂購|谘詢 眼皮膚白病Ⅱ蛋白(OCA2) 規格: 20mg
柴胡皂苷D 訂購|谘詢 眼質蛋白(OCLM) 規格: 20mg
長春花 訂購|谘詢 野色基因相關(guan) 蛋白(AGRP) 規格: 20mg
白術內(nei) 酯Ⅰ 訂購|谘詢 野色基因相關(guan) 蛋白(AGRP) 規格: 20mg
白樺脂醛 訂購|谘詢 野色基因相關(guan) 蛋白(AGRP) 規格: 20mg
補骨脂素 訂購|谘詢 晚期糖基終末產(chan) 物(AGE) 規格: 20mg
十六 訂購|谘詢 晚期糖基終末產(chan) 物受體(ti) (AGER) 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
香蒲新甙 訂購|谘詢 晚期糖基終末產(chan) 物受體(ti) (AGER) 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
胡黃連苷I 訂購|谘詢 唾液α1(AMY1) 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
右旋奎寧 訂購|谘詢 唾液α1(AMY1) 規格: ≥98%,20mg/vial
亥茅苷 訂購|谘詢 唾液富組蛋白1(HTN1) 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
內(nei) 酯 訂購|谘詢 唾液富組蛋白3(HTN3) 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
異鉤藤 訂購|谘詢 唾液酯酶(SIAE) 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
沒食子 訂購|谘詢 唾液轉移酶1(SIAT1) 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
黃芪皂苷 II 訂購|谘詢 唾液轉移酶4A(SIAT4A) 規格: HPLC≥98%,10mg/vial
白果內(nei) 酯 訂購|谘詢 唾液轉移酶4B(SIAT4B) 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
花青素 訂購|谘詢 唾液轉移酶4C(SIAT4C) 規格: HPLC≥98%,5mg/vial
去氫鉤藤 訂購|谘詢 唾液轉移酶7A(SIAT7A) 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
SPNS1 SPNS1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Sodium ferulic
beta Bax/BCL2 associated X protein BCL2相關(guan) X蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Cefditoren pivoxil
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Cefditoren pivoxil
CARD10 BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Pyrazinamide
CARD12 凋亡加強結構域蛋白12抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Pyrazinamide
CARD14 凋亡加強結構域蛋白14抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Demeclocycline hydrochloride
CARD15 凋亡加強結構域蛋白15抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Demeclocycline hydrochloride
CARD4 凋亡加強結構域蛋白4抗體(ti) 現貨供應 0.2ml NMethyl Paroxetine
鋅片 進口、國產(chan) 英文名稱:Zinc 含量:BR,95%
新生 進口、國產(chan) 英文名稱:NovobiocinSodiumSalt 含量:BR,95%
新銅試劑 進口、國產(chan) 英文名稱:Cuprizon 含量:AR,99%
猩紅S 進口、國產(chan) 英文名稱:PonceauS 含量:CP,500%
胸苷二 進口、國產(chan) 英文名稱:TMP 含量:植物細胞培養(yang) 級,99%
進口、國產(chan) 英文名稱:Thymine 含量:USP級,98%
百裏香酚藍 進口、國產(chan) 英文名稱:Bromothymolbluesodiumsalt 含量:高純,98%
代十二基*銨 進口、國產(chan) 英文名稱:DTAB 含量:IND
酚蘭(lan) 進口、國產(chan) 英文名稱:BPB 含量:CP,98%
酚蘭(lan) 進口、國產(chan) 英文名稱:Bromophenolbluesodiumsalt 含量:CP,98%
發綠色熒光的小鼠胚胎幹細胞;G1大腸杆菌/大腸菌群液體(ti) 顯色培養(yang) 基規格:1000ml用途:用於(yu) 快速、準確同時檢測大腸杆菌和大腸菌群,培養(yang) 24小時,大腸杆菌顯藍色熒光,大腸菌群顯藍色
萋 - 尼氏染色液規格:5ml/支*6用途:用於(yu) 細菌抗染色
煌綠瓊脂(BGA)規格:250g用途:用於(yu) 沙門氏菌的分離培養(yang)
乙基紫疊氮鈉肉湯規格:250g用途:用於(yu) 鏈球菌的增菌培養(yang)
布氏肉湯規格:或加瓊脂配製布氏瓊脂詳情介紹
艾格瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 過程中無菌監測
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。