實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

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細胞名稱  山羊腎上皮樣細胞；DG-K1
形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雄性山羊的腎組織，2010年由中科院昆明細胞庫建立。

培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代；3-4天一次

傳(chuan) 代情況: P3

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 熒光法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
脂氧合酶同工酶1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；WSSV-K1形態特性: 淋巴母細胞樣LOX-1

脂氧合酶同工酶2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；WSSV-K2形態特性: 淋巴母細胞樣LOX-2

脂氧合酶同工酶3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；Ss-IgM形態特性: 淋巴母細胞樣LOX-3

脂氧合酶同工酶4檢測試劑盒細胞名稱: 胃癌耐藥細胞株；BGC823/形態特性: 上皮樣LOX-4

CD56分子檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；MCM1形態特性: 淋巴母細胞樣Cluster of differentiation 56

轉酶檢測試劑盒細胞名稱: 肝癌細胞株；LM3形態特性: 上皮樣transglutaminase

酪蛋白α檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；LCZ4H3形態特性: 淋巴母細胞樣Casein Alpha

Ⅹ組磷脂酶A2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；Sm-IgM形態特性: 淋巴母細胞樣Phospholipase A2, Group X

甘露聚糖結合凝集素絲(si) 氨肽酶-3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；LCZ2A6形態特性: 淋巴母細胞樣Mannose Associated Serine Protease 3

肌醇3磷合成酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；7G4.3形態特性: 淋巴母細胞樣Ins(3)P1 synthase

類粘蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；11-1形態特性: 淋巴母細胞樣Alpha-1-acid glycoprotein 1

SPARC相關(guan) 模塊化鈣結合蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；4E11形態特性: 淋巴母細胞樣SPARC-related modular calcium-binding protein 1

梅迪-維斯納病檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；5D5形態特性: 淋巴母細胞樣Maedi-Visna Disease

鐵結合蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；5C8H5形態特性: 淋巴母細胞樣Iron-binding proteins

去酰氨基麥醇溶蛋白抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；6G8形態特性: 淋巴母細胞樣DGP-Ab

細胞色素氧化酶2C9檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；mAbD7形態特性: 淋巴母細胞樣Cytochrome oxidase 2C9

蛋白酪氨磷酶K檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；N2D1形態特性: 淋巴母細胞樣Protein tyrosine phosphatase K
山羊腎上皮樣細胞；DG-K1小白菊內(nei) 酯20554-84-1英文名：Parthenolide  

英文別名：2,3,6,7,7a,8,10a,10b-Octahydro-1a,5-dimethyl-8-methyleneoxireno(9,10)cyclodeca(1,2-b)furan-9(1aH)-one;Parthenolide;4Xi-germacra-1(10),11(13)-dien-12-oic acid, 4,5-epoxy-6.alpha.-hydroxy-, gamma-lactone;Oxireno(9,10)cyclodeca(1,2-B)furan-9(1ah)-one, 2,3,6,7,7A,8,10A,10B-octahydro-1A,5-dimethyl-8-methylene-;Parthenlide  

CAS登錄號：20554-84-1

分子式：C15H20O3

分子量：248.32

分子結構：

外觀：棕黃色粉末

規格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用於(yu) 含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：木蘭(lan) 科觀光木屬植物宿軸木蘭(lan) (Tsoongiodendronodorum Chun)

溶解性：溶於(yu) 、、ＤＭＳＯ等有機溶劑，不溶於(yu) 水。

熔點：115 °C

藥理藥效：主要用於(yu) 治療皮膚感染、風濕病和偏頭疼，並能使腫瘤細胞發生細胞周期阻滯，抑製腫瘤細胞增殖。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年