公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

細胞名稱  小鼠SRSV轉化的3T3細胞；SRSV/3T3
形態特性: 圓形

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 這株細胞是NIH/3T3細胞用SRS小鼠腹水瘤無細胞提取物感染並在體(ti) 外傳(chuan) 代。在感染過的NIH/3T3細胞的細胞質中發現了A型和Ｃ型病毒顆粒。發現細胞中有逆轉錄酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA。用這個(ge) 培養(yang) 細胞對BALB/c裸鼠進行皮下接種，誘導生成纖維肉瘤。

培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%

傳(chuan) 代方法: 消化3-5分鍾。1:2。3天內(nei) 可長滿。

傳(chuan) 代情況: PN

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
rmE-Selectin (CD62E)/Fc, CF (100 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞；DV2-M14 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmES31-like, CF (10 UG)細胞名稱: 發綠色熒光的小鼠胚胎幹細胞；G1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmErbB4/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞；3F16A4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmErbB3/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎幹細胞；LT04 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmEpo, CF (10 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞；DV2-M6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmEpo R/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞；CHGF-001 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmEpo (10 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞；CHGF-002 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmEpiregulin, CF (50 UG)細胞名稱: 高背鯽魚尾鰭細胞；GBJd M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

rmEpiregulin (50 UG)細胞名稱: 大鼠癌細胞；CHGF-003 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmEpigen, CF (25 UG)細胞名稱: 人胚肺成纖維細胞；MRC-5 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)10%FBS

rmEpigen (25 UG)細胞名稱: 人胚肺二倍體(ti) 細胞；HEL-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rmEphrin-B2/Fc, CF (200 UG)細胞名稱: 人胚腎二倍體(ti) 細胞；HEK-2 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rmEphrin-B2/Fc Biot (25 UG)細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934 RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

rmEphrin-B1/Fc, CF (200 UG)細胞名稱: 人細胞；HeLa DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%NBS

rmEphrin-B1/Fc Biot (25 UG)細胞名稱: 大鼠耳蝠皮膚細胞；BMS2 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

rmEphrin-A4/Fc, CF (200 UG)細胞名稱: 大蹄蝠皮膚細胞；GRBS1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
小鼠SRSV轉化的3T3細胞；SRSV/3T3人促胰液素/分泌素受體(ti) (SR)ELISA試劑盒OT/BGPELISAkit產(chan) 品規格:48T/96T。

人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒OTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒OTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人(Thymosin)ELISA試劑盒OTF2AELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人(TP-5)ELISA試劑盒OTF2BELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人胰島素自身抗體(ti) (IAA)ELISA試劑盒ovariancancermarker-CA125ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人胰多肽(PP)ELISA試劑盒OVAsIgEELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒OVAsIgEELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。