公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞；HFTF | 貼壁生長 | EY-X63306 |
細胞名稱 胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞；HFTF
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 北京眼科研究所建係。
培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:2~1:3傳(chuan) 代；3~4天1次。
傳(chuan) 代情況: P9
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 培養(yang) 法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
EHDAB；十六烷基二甲基基eIF4B Antibody2--氟吡啶
十二烷基二甲基基eIF4B Antibody三氟磺酸酮
十四烷基二化銨Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (redFluor™ 710 Conjuga)甲氧基-5-三氟
HDBAC；十六烷基二化銨Malic Enzyme 2 (E1N3F) XP® Rabbit mAb三氟甲
十烷基*基化銨Grp75 (D13H4) XP® Rabbit mAb三基酸叔丁酯
辛基*基化銨;八烷基*基化銨Grp75 (D13H4) XP® Rabbit mAb氟-羥基甲酸
2-溴基*基Calmodulin (D1F7J) Rabbit mAb對氟
溴基*基(BPTAB)eIF2B-ε Antibody2--6-並噻唑
十二烷基二化銨Phospho-eIF2α (Ser51) (119A11) Rabbit mAb2-溴-氟磺酰
DDAB；雙十烷基二甲基Phospho-eIF2α (Ser51) (119A11) Rabbit mAb溴-氟磺酰
雙十二烷基二甲基FLI1 (D7N5M) Rabbit mAb(1R,2R)-1,2-二基二
L-賴氨酸DNMT3A (D23G1) Rabbit mAb2-亞甲基-1,
L-賴氨酸SimpleChIP® NRIP1 Upstream Primers氨酰基酸
L-EpCAM Antibody4,6-二甲基-2-甲磺酰基嘧啶
L-(標準品)Phospho-BLNK (Tyr96) AntibodyH-HIS(TRT)-OH
L-Phospho-BLNK (Tyr96) Antibody(5-甲基異惡唑-基)甲
L-(標準品)Cdc7 Antibody4,二氟酰酸酯
L-(標準品）CDC37 (V367) Antibody2-氟-5-三氟酸
L-SNAT1/SLC38A1 (D9L2P) Rabbit mAbBoc-1-氨基環戊烷羧酸
L-鹽酸鹽DIDO1 Antibody氟甲
DL-RanGAP1 (D2T7T) Rabbit mAb2-(三酰)吡咯
L-NCAM (CD56) Antibody三氟化-二甲絡合物
L-異(標準品)NEDD4 (C5F5) Rabbit mAb1-(2-甲氧基)呱
L-異Notch1 (D1E11) XP® Rabbit mAb二氟溴酸
L-CDK10 (D8Z7Z) Rabbit mAb氨基甲酰
DL-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) Antibody1,1,1-三三氟烷
L-氨酸Tuberin/TSC2 Antibody五氟烷
L-天冬酰;L-天冬酰一水 Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571) Antibody2-氨基-3,5-二溴吡啶
L-(標準品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody全氟己基烷
L-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody1-叔丁基-
L-HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb3,5-二甲基呱啶
L-鹽酸鹽HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb4,5-二甲基噻唑
L-半Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) Antibody氨基-羥基磺酰
L-半(標準品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb2,3,4,5-四甲氧
L-半鹽酸鹽，一水Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb1,5-二-戊酮
DL-半CDC37 (V297) Antibody2,5-二甲氧基
性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-DSC2 Polyclonal Antibody
胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞；HFTF大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒CTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠內(nei) 皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒CTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒CTGFELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒CTGFELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠抗IVIgG抗體(ti) ELISA試劑盒CTGFELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠抗IgE受體(ti) 抗體(ti) ELISA試劑盒CTLA-4ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒cTn-ⅠELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
大鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒cTn-ⅠELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
