綜合微生物的培養(yang) 方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)製備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配製培養(yang) 材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yang) ;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yang) ;
(5)分離並檢測;
(6)取液儲(chu) 存;通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強,培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
規格參數:
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羅伊氏短芽孢杆菌規格 | Brevibacil | EY-J963530 |
資源名稱: 羅伊氏短芽孢杆菌
種屬: Brevibacillus reuszeri
提供形式: 凍幹物
安全等級: 1
模式菌株: yes
應用領域: 模式菌株
培養(yang) 基: 營養(yang) 肉汁瓊脂:蛋白腖 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yang) 芽孢杆菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利於(yu) 產(chan) 生芽孢。
生長條件: 30℃,好氧
生長特性: 革蘭(lan) 氏陽性細菌,形成芽孢。
存儲(chu) 條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍幹燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個(ge) 月,若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個(ge) 月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中,密封於(yu) 安瓿管內(nei) ,然後控製冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置於(yu) -150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) :
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基,培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1%,氮源不超過0.5%),碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境,不利於(yu) 放線菌孢子的形成,氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下,幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃,少數為(wei) 37 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 5~14天。
⑵ 黴菌孢子的製備
黴菌的孢子培養(yang) ,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖,而且這類培養(yang) 基的表麵積較大,可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25~28 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 4~14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*,並易被菌體(ti) 分解利用,氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃,子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備
種子罐種子製備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中,經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ,這樣的種子稱為(wei) 一級種子,把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ,經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ,這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子,將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為(wei) 四級發酵。
Calvatia│cyathiformis 中文名稱:杯形禿馬勃Calvatia│cyathiformis提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:≥98%
Ganoderma│nus 中文名稱:密紋靈芝Ganoderma│nus提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用、培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:豐(feng) 度:99atom%;化學純度:≥98.5%
Tricholoma│matsutake 中文名稱:鬆口蘑(鬆茸)Tricholoma│matsutake提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:與(yu) 赤鬆、黑鬆、高山鬆等形成外生菌根,食用,共生菌培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:豐(feng) 度:99atom%;化學純度:≥98.5%
Coriolopsis│sanguinaria 中文名稱:血紅擬革蓋菌Coriolopsis│sanguinaria提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Ganoderma│capense 中文名稱:薄樹靈芝Ganoderma│capense提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Ganoderma│neo-japonicum 中文名稱:新日本靈芝Ganoderma│neo-japonicum提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Coriolopsis│gallica 中文名稱:擬革蓋菌Coriolopsis│gallica提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Paxillus│involutus 中文名稱:卷邊網褶菌Paxillus│involutus提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃存儲(chu) 條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
羅伊氏短芽孢杆菌規格FLAG Tag(CT) FLAG Tag標簽抗體(ti) (C端)山綠茶9,9-二甲基氧雜蒽Human REG3α (Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha) ELISA Kit
Gst P1/GST class-pi 硫轉移酶pi基因抗體(ti) 廣金錢草1--3-(氧基)苯Human Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit
T7 tag T7 tag標簽抗體(ti) 大黃(掌葉大黃)1--3-(氧基)苯Human SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit
V5 tag V5 tag標簽抗體(ti) 沒藥(膠質沒藥)1,6-雙(二苯基膦基)己烷Human LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit
KT3 tag KT3 tag抗體(ti) 青風藤1,6-雙(二苯基膦基)己烷Human REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit
VSV-G tag VSV-G tag標簽抗體(ti) 1,6-雙(二苯基膦基)己烷Human S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit
HIV gp120 艾滋病病抗體(ti) 丁香葉辛Human S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit
HIV gp41 艾滋病病抗體(ti) 薏苡仁辛Human GPR37 (G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit