實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

​
細胞名稱  乳腺癌細胞；BC－027
形態特性: 上皮樣細胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: BC－027乳腺癌細胞由中國人種乳腺癌組織經培養(yang) 選擇獲得，於(yu) 2007年建立鑒定，是乳腺癌基礎研究和臨(lin) 床研究的材料。

培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；50u/ml試劑胰島素

傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,2-3天傳(chuan) 一代

傳(chuan) 代情況: C18

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
Sinoacutine

CAS No.：4090-18-0

中文名：青風藤

分子式：C19H21NO4

百秋李 訂購|谘詢 　絡絲(si) 蛋白(RL) 規格： 20mg

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紫草苷 訂購|谘詢 　載脂蛋白A1(APOA1) 規格： 20mg

瓜蔞皮對照藥材 訂購|谘詢 　載脂蛋白A1(APOA1) 規格： 1g

黨(dang) 參對照藥材 訂購|谘詢 　載脂蛋白A1(APOA1) 規格： 1g

芥 訂購|谘詢 　載脂蛋白A1(APOA1) 規格： 20mg

α亞(ya) 訂購|谘詢 　載脂蛋白A1(APOA1) 規格： 20mg

泛鈣 訂購|谘詢 　載脂蛋白A2(APOA2) 規格： 20mg

黃豆黃素 訂購|谘詢 　載脂蛋白A2(APOA2) 規格： 20mg

腐 訂購|谘詢 　載脂蛋白A2(APOA2) 規格： 20mg

葒草苷 訂購|谘詢 　載脂蛋白A2(APOA2) 規格： 20mg

吳茱萸內(nei) 酯 訂購|谘詢 　載脂蛋白A2(APOA2) 規格： 20mg

內(nei) 酯 訂購|谘詢 　載脂蛋白A4(APOA4) 規格： 10mg

單寧（UV98%） 訂購|谘詢 　載脂蛋白A4(APOA4) 規格： 20mg

因 訂購|谘詢 　載脂蛋白A4(APOA4) 規格： 20mg

白頭翁皂苷B4 訂購|谘詢 　載脂蛋白A4(APOA4) 規格： 20mg

消旋山莨菪 訂購|谘詢 　載脂蛋白A5(APOA5) 規格： 20mg

AQP0/MIP26  水通道蛋白0抗體(ti)    現貨供應 0.1ml ()Hyoscyamine

TYK2  非受體(ti) 酪蛋白激酶2抗體(ti)    現貨供應 0.1ml Dextran D70

HRH1  組受體(ti) H1抗體(ti)    現貨供應 0.1ml Dextran D40

HRH2  組受體(ti) H2抗體(ti)    現貨供應 0.1ml Dextran D20

phosphoHRH1(Ser398)  組受體(ti) H1抗體(ti)    現貨供應 0.1ml Saxagliptin HCL

HOXA11  同源盒蛋白HOXA11抗體(ti)    現貨供應 0.1ml EGCG, ()Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract

HOXA9  同源盒蛋白HOXA9抗體(ti)    現貨供應 0.1ml Dasatinib Monohydrate

HOXB5  同源盒蛋白HOXB5抗體(ti)    現貨供應 0.1ml Exemestane (USP)

羥基尿素  進口、國產(chan)  英文名稱:Hydroxyurea  含量:BR，99%

羥基甾族合物還原酶  進口、國產(chan)  英文名稱:HSD  含量:BR，5u/ul，99%

羥甲基樹脂  進口、國產(chan)  英文名稱:Hydroxymethylresin  含量:BR

鞘酯  進口、國產(chan)  英文名稱:Sphingomyelin  含量:BR，98%

親(qin) 和素  進口、國產(chan)  英文名稱:Avidin(chikeneggwhite)  含量:BR，0.1u/mg

青G鉀  進口、國產(chan)  英文名稱:PenicillinGPotassiumsalt  含量:BR，98%

青G  進口、國產(chan)  英文名稱:PenicillinGNasalt  含量:寡肽級，90%

青鏈兩(liang) 性B溶液  進口、國產(chan)  英文名稱:Penicillin&Streptomycin&AmphotericinBsolution,γIrradiated  含量:高純，90%，適合電泳

青鏈溶液  進口、國產(chan)  英文名稱:Penicillin&Streptomycinsolution,γIrradiated  含量:金標級，99%，可做金標抗體(ti)

青鏈新溶液  進口、國產(chan)  英文名稱:Penicillin&Streptomycin&Neomycinsolution,γIrradiated  含量:BR，80%
乳腺癌細胞；BC－027大腸杆菌噬菌體(ti) MS2液體(ti) 培養(yang) 基規格：250g用途：用於(yu) 大腸杆菌噬菌體(ti) MS2培養(yang)

大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yang) 基規格：250g用途：一種通用的營養(yang) 培養(yang) 基,用於(yu) 各種微生物的培養(yang)

規格：500g用途：微生物指示劑

瓊脂規格：250g用途：用於(yu) 霍亂(luan) 弧菌的分離培養(yang)

蛋白腖規格：250g用途：用於(yu) 製備0.1%蛋白腖水，用於(yu) 空腸彎曲菌的預增菌

馬鈴薯液體(ti) 培養(yang) 基（含黴素）規格：250g用途：用於(yu) 黴菌和酵母菌增菌培養(yang)