細胞名稱 支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B
形態特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一正常人的支氣管上皮組織。後經Ad12SV40病毒感染並。該細胞可用於(yu) 檢測化學和生物製劑的致癌作用。
培養(yang) 條件: LCH-8
傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次
傳(chuan) 代情況: PN16
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B | 貼壁生長 | EY-X63881 |
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
膜聯蛋白-A5IgG抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3形態特性: 多角Annexin A5 IgG antibody
膜聯蛋白-A5IgM抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6形態特性: 多角Annexin A5 IgM antibody
糖基化終末產(chan) 物檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3形態特性: 多角advanced glycation end products
酪酪肽3-36檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠誘導性多潛能幹細胞;PUMC-mips-D3形態特性: 克隆樣Peptide YY3-36
PIM1激酶檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8形態特性: 多角PIM1 kinase
抗流行性出血熱病IgM抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1形態特性: 多角Anti-Epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody
腸道病71型IgM抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6形態特性: 多角enterovirus-71 IgM antibody
核轉錄因子p52檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5形態特性: 多角Nuclear factor-kappa B P52
COL12A1檢測試劑盒細胞名稱: tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3形態特性: 多角Collagen alpha-1(XII) chain
糖化鐵蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤(B類);C3110D2B2形態特性: 淋巴母細胞樣glycosylated ferritin
PL7抗體(ti) ;抗蘇氨酰tRNA合成酶檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12形態特性: 淋巴母細胞樣anti-PL7-antibody
Ⅷ型膠原α2檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2形態特性: 淋巴母細胞樣collagen alpha-2(VIII) chain
抗細胞膜DNA抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02形態特性: 多角cell membrane associated DNA antibody
抗著絲(si) 點抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤(B類);C3110D2E11形態特性: 淋巴母細胞樣anti-centromere antibody
抗α-胞襯蛋白抗體(ti) IgG;IgA檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7形態特性: 淋巴母細胞樣α-FodrinIgG;IgA
Abl交互子3檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤(B類);Z2310B6B11B1G4F3C11形態特性: 淋巴母細胞樣ABI gene family member 3
腫瘤壞死因子受體(ti) γ檢測試劑盒細胞名稱: 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184形態特性: 成纖維細胞樣Tumor Necrosis Factor receptor γ
支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B氧代川南亭分子式:C19H18O5
分子量:323
CAS登錄號:新品待定
分子結構:
規格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用於(yu) 含量測定/鑒定/藥理實驗等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年