公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
膀胱癌細胞;H/RB-CL2 | 貼壁生長 | EY-X63683 |
細胞名稱 膀胱癌細胞;H/RB-CL2
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yang) 條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,3-4天傳(chuan) 1次
傳(chuan) 代情況: C4
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Matrine
CAS No.:519-02-8
中文名:苦參
分子式:C15H24N2O
異綠原 C 訂購|谘詢 樣糖基轉移酶(LARGE) 規格: HPLC≥98%,20mg/vial
桑皮苷C 訂購|谘詢 根蛋白(RDX) 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
黃芪皂苷 III 訂購|谘詢 速激肽1(TAC1) 規格: HPLC≥98%,10mg/vial
羥基積雪草苷 訂購|谘詢 速激肽4(TAC4) 規格: HPLC≥98%;20mg/vial
黃芪皂苷 I 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 1(TACR1) 規格: HPLC≥98%,10mg/vial
雙氫素 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 1(TACR1) 規格: C15H24O5,UV≥98%
蒼耳子對照藥材 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 1(TACR1) 規格: 1g
氧基白屈菜紅 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 2(TACR2) 規格: 10mg
朝藿定A 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 2(TACR2) 規格: 20mg
杠柳苷 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 2(TACR2) 規格: 20mg
偽(wei) 原 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 2(TACR2) 規格: 20mg
牛蒡子苷元 訂購|谘詢 速激肽受體(ti) 3(TACR3) 規格: 20mg
紫蘇葉對照藥材 訂購|谘詢 配子發育蛋白(GGN) 規格: 1g
牛磺 訂購|谘詢 配對框基因6(PAX6) 規格: 20mg
透骨草對照藥材 訂購|谘詢 配對框基因9(PAX9) 規格: 1g
東(dong) 莨菪苷 訂購|谘詢 夏科雷登氏結晶蛋白(CLC) 規格: 10mg
甘草查爾A 訂購|谘詢 夏科雷登氏結晶蛋白(CLC) 規格: 20mg
川芎嗪 訂購|谘詢 破骨細胞關(guan) 聯受體(ti) (OSCAR) 規格: 100mg
IL11RA 白介素11受體(ti) α/IL11Rα抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Imipenem and Cilastatin Sodium
KQ1 離子通道蛋白家族KQ1抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Vinpocetine
IL10 白細胞介素10抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Phenytoin sodium
LIPG/Endothelial lipase 內(nei) 皮脂肪酶抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Oxcarbazepine
MSR1/CD204 巨噬細胞清道夫受體(ti) 1/2/3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Oxcarbazepine
NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體(ti) 蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Hypericin
Perilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B抗體(ti) 現貨供應 0.2ml D(+)Glucopyranose 6phosphate
FLIP delta + gamma 凋亡調節蛋白δ+γ抗體(ti) 現貨供應 0.2ml DGluconate 6phosphate 3sodium salt
三脫腺苷 進口、國產(chan) 英文名稱:dATP,2Na 含量:BR,98%
三脫胸苷 進口、國產(chan) 英文名稱:TTP 含量:生物技術級,95%
三代蔗糖 進口、國產(chan) 英文名稱:Sucralose 含量:高純,98%
三鉍 進口、國產(chan) 英文名稱:BismuthChloride 含量:BR
三 進口、國產(chan) 英文名稱:Iodinetrichloride 含量:CP,90%
三鉻 進口、國產(chan) 英文名稱:Chromicchloridehexahydrate 含量:AR
三金 進口、國產(chan) 英文名稱:Gold(III)chloride 含量:特純,97%
三釹 進口、國產(chan) 英文名稱:Neodymium(III)chloride 含量:超純,99.5%
三鈰 進口、國產(chan) 英文名稱:Cerouschloride 含量:試劑級,98%
三銦 進口、國產(chan) 英文名稱:Indiumchloride 含量:GR,99.8%
膀胱癌細胞;H/RB-CL2MMO-MUG培養(yang) 基規格:100g用途:用於(yu) 生活飲用水及其水源水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的同時檢測
阪崎腸杆菌顯色培養(yang) 基(DFI瓊脂)規格:1000ml用途:用於(yu) 阪崎杆菌的顯色培養(yang) ,阪崎杆菌顯藍色,其它腸杆菌顯無色。
萘啶(9mg)規格:1ml/支*5用途:每支添加於(yu) 225ml HB4186中
化鈉結晶紫增菌液規格:250g用途:用於(yu) 副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yang) (GB標準)
鼠李糖發酵管規格:20支用途:用於(yu) 單增李氏菌生化鑒定
磷鹽葡萄糖腖水培養(yang) 基規格:BR250g詳情介紹
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。