產(chan) 品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體(ti) 係中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個(ge) PCR進程,使每個(ge) 循環變得“可見”。本產(chan) 品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為(wei) 基礎開發的專(zhuan) 門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
葡萄孢菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Botrytis cinerea | EY00P8742 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為(wei) 12個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chu) 存條件:-20℃避光保存,避免反複凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶隻需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們(men) 提取RNA,設計並合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及後續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀(yi) 器及分析報告
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei) 例)。由於(yu) 標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬(wan) 不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)。為(wei) 增加產(chan) 品穩定性和避免擴散傳(chuan) 染性病原,本產(chan) 品不提供活體(ti) 樣品做陽性對照,隻提供無傳(chuan) 染性的 DNA 段作為(wei) 陽性對照。
1. 標記 6 個(ge) 離心管,分別為(wei) 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鍾,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鍾,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鍾,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重複上麵的操作直到得到 6 個(ge) 稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的製備
7. 如果有N個(ge) 樣品,設置N+2個(ge) 提取,多出的一個(ge) 是PC(樣品製備陽性對照),一個(ge) 是 NC(樣品製備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體(ti) 積跟每次製備要求的體(ti) 積一樣,以此作為(wei) PC。另外用水作為(wei) NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為(wei) RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體(ti) 係,在樣品製備室進行)
9. 如果做定量分析並且隻做1次重複,則標記N+9個(ge) PCR 管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的 N+2個(ge) 樣品,1個(ge) 用於(yu) PCR陰性對照(用水做模板),6個(ge) 用於(yu) 標準曲線。如果做定性分析,並且隻做1次重複,則標記N+4 個(ge) PCR管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的N+2個(ge) 樣品,1 個(ge) 用於(yu) PCR 陰性對照(用水做模板),1個(ge) 用於(yu) PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下麵隻以定量分析為(wei) 例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表隻列出一次重複。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照,並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chu) 存好後加)
1,4-二-2-氟苯 COUMARIN(RG) Eprosartan mesylate
對乙氧基苯甲酰氯 COUMARIN(P) Benzamidine HCl
4-羥甲基四氫吡喃 COUMARIN(P) Chromium(III) chloride
依澤替米貝 COUMARIN(P) Creatine, monohydrate
4-甲基磺酰2-羥基肉桂酸 COUMARIC ACID, 2-(RG) Dextran-10
2,4-二甲基苄反-對香豆酸 COUMARIC ACID, TRANS-P-(RG) Ammomium ferric citrate
反式-3-羥基肉桂酸對羥基肉桂酸 COUMARIC ACID, 4-(4-HYDROXYCINNAMIC ACID)(RG) Choline chloride
伯森坦可替寧 COTININE(RG) D-Gluconolactone
4-氯噻吩並[3,2-d]嘧啶肉磷酯 CREATINOL-O-PHOSPHATE(P) Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30
苯海拉明鹽酸鹽肌酐 CREATININE(P) Magnesium acetate, tetrahydrate
1-巰甲基環基乙酸肌酐 CREATININE(P) Sodium phosphate, monobasic, monohydrate
偏酸鉛肌酐 CREATININE(P) Calcium gluconate, hydrate
3-甲氧基-4-(二氟甲氧基)苯甲肌酐 CREATININE(RG) N-Dodecyl-b-maltoside
5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-[(叔丁基)二甲基矽基]-N-異丁酰基鳥苷-3'-CREATINE PHOSPHATE DISODIUM SALT TETRAHYDRATE(AS)(REQUEST QUOTE) Aminourea hydrochloride
3-環甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸 CREATINE PHOSPHATE DISODIUM SALT(RG) Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml
葡萄孢菌探針法PCR熒光定量試劑盒鈣結合蛋白(CR)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:HPLC>98%,標準品100ml
155kDa核孔蛋白(NUP155)(酶聯免疫吸附試驗法)(標準品) 質量規格:>99%,BR6次/盒
腎上腺素能受體(ti) α1A(ADRα1A)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:HPLC≥98%,標準品6次/盒
多巴受體(ti) D1(DRD1)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:含量≥670µg/mg3×1ml
CD28分子(CD28)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:>99%6次/盒
不對稱二甲基(ADMA)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:>99%100ml
野鼠色基因相關(guan) 蛋白(AGRP)(酶聯免疫吸附試驗法)(標準品) 質量規格:>99%,AR1ml(500X)
集聚蛋白(AGRN)(酶聯免疫吸附試驗法)坦度替尼;MLN518 質量規格:HPLC>98%,標準品500 ml