公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
犬腎細胞係/野生型;MDCK/wild | 貼壁生長 | EY-X63654 |
細胞名稱 犬腎細胞係/野生型;MDCK/wild
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞係源自一隻雌性英國可卡犬的腎髒組織,由S.H.MadinandN.B.Darby於(yu) 1958年建立。該細胞為(wei) 角蛋白陽性細胞。
培養(yang) 條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,2-3天傳(chuan) 一代
傳(chuan) 代情況: C7
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Picrasidine A
CAS No.:82652-20-8
中文名:
分子式:C27H22N4O3
假荊芥屬苷;Nepitrin 訂購|谘詢 鈣黏蛋白18(CDH18) 規格: 20mg
基黃連;Worenine chlor 訂購|谘詢 鈣黏蛋白19(CDH19) 規格: 20mg
紅鬆內(nei) 酯;Pinusolide 訂購|谘詢 鈣黏蛋白20(CDH20) 規格: 20mg
黃杞苷;Emgelitin 訂購|谘詢 鈣黏蛋白22(CDH22) 規格: 20mg
枸橘苷;Poncirin 訂購|谘詢 鈣黏蛋白23(CDH23) 規格: 20mg
番茄紅素;Lycopene 訂購|谘詢 鈣黏蛋白24(CDH24) 規格: 20mg
冬淩草素;Ponicidin 訂購|谘詢 鈣黏蛋白26(CDH26) 規格: 10mg
大麥芽;Hordenine 訂購|谘詢 鈣黏蛋白7(CDH7) 規格: 20mg
草質素苷;Rhodionin;Herba 訂購|谘詢 鈣黏蛋白8(CDH8) 規格: 20mg
長梗冬青苷;Pedunculoside 訂購|谘詢 鈣黏蛋白9(CDH9) 規格: 20mg
白蠟樹精;Fraxil 訂購|谘詢 /氫交換因子1(NHE1) 規格: 20mg
L薄荷;LMenthol 訂購|谘詢 //鈣交換因子1(NCKX1) 規格: 20mg
格洛苷C;Angoroside C 訂購|谘詢 //鈣交換因子2(NCKX2) 規格: 20mg
磺間氧;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 /離子轉運ATP酶α1肽(ATP1α1) 規格: 0.1g
亞(ya) ;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 /離子轉運ATP酶α2肽(ATP1α2) 規格: 0.1g
撲草淨;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 /離子轉運ATP酶β1肽(ATP1β1) 規格: 0.1g
酰草;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 /離子轉運ATP酶β1肽(ATP1β1) 規格: 0.1g
草;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 /離子轉運ATP酶β3肽(ATP1β3) 規格: 0.1g
DDIT4L DNA損傷(shang) 誘導轉錄樣蛋白4抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Oxybutynin HCl
DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自調節因子1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Oxybutynin HCl
EID3 E1A樣分抑製因子3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Paroxetine HCl
ERCC6L 發育相關(guan) 蛋白ERCC6L抗體(ti) (致畸因子) 現貨供應 0.2ml Paroxetine HCl
FAM107A 腎細胞癌下調蛋白1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Piroxicam
FRK/PTK5 胃腸道相關(guan) 酪激酶抗體(ti) (蛋白酪激酶5) 現貨供應 0.2ml Piroxicam
GANP 生發中心相關(guan) 核蛋白MCM3抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Posaconazole
GIDRP88 生長抑製和分相關(guan) 蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Posaconazole
櫟精 進口、國產(chan) 英文名稱:Quercetin 含量:BR,99%
進口、國產(chan) 英文名稱:Furazolidone 含量:BR
聯大茴香 進口、國產(chan) 英文名稱:3,3'Dimethoxybenzidine 含量:BR,4%
聯大茴香 進口、國產(chan) 英文名稱:oDianisidinedihydrochloride 含量:高純,98%
鏈酶親(qin) 和素 進口、國產(chan) 英文名稱:Streptavidin 含量:生物技術級,10u/mg
鏈黴菌屬十字孢 進口、國產(chan) 英文名稱:StaurosporinefromStreptomycessp. 含量:USP級,99%
鏈脲 進口、國產(chan) 英文名稱:Streptozotocin 含量:BR,9600%
鏈球菌纖溶酶 進口、國產(chan) 英文名稱:Streptokinaserecombinant 含量:高純,30u/mg
鏈絲(si) 菌蛋白酶 進口、國產(chan) 英文名稱:PronaseE 含量:BR,300u/mg
兩(liang) 性 進口、國產(chan) 英文名稱:AmphotericinB 含量:BR,90%
犬腎細胞係/野生型;MDCK/wildPPLO瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 支原體(ti) 分離和培養(yang) 的基礎培養(yang) 基
衛矛醇半固體(ti) 規格:20支詳情介紹
木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂對照培養(yang) 基規格:11.0g/200mL,30袋/盒用途:培養(yang) 基適用性實驗
LG培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 黴菌、酵母菌、耐熱黴菌及細菌總數的檢測,可用於(yu) PET瓶及無菌罐裝線的無菌驗證。
亞(ya) 碲鉀血瓊脂基礎規格:250g用途:用於(yu) 白喉杆菌的分離培養(yang)
SC瓊脂基礎規格:50%卵黃乳液用途:5ml
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。