產(chan) 品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體(ti) 係中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個(ge) PCR進程,使每個(ge) 循環變得“可見”。本產(chan) 品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為(wei) 基礎開發的專(zhuan) 門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
幼蟲芽孢杆菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Paenibacillus larvae | EY00P9212 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為(wei) 12個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chu) 存條件:-20℃避光保存,避免反複凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶隻需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們(men) 提取RNA,設計並合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及後續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀(yi) 器及分析報告
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei) 例)。由於(yu) 標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬(wan) 不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)。為(wei) 增加產(chan) 品穩定性和避免擴散傳(chuan) 染性病原,本產(chan) 品不提供活體(ti) 樣品做陽性對照,隻提供無傳(chuan) 染性的 DNA 段作為(wei) 陽性對照。
1. 標記 6 個(ge) 離心管,分別為(wei) 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鍾,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鍾,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鍾,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重複上麵的操作直到得到 6 個(ge) 稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的製備
7. 如果有N個(ge) 樣品,設置N+2個(ge) 提取,多出的一個(ge) 是PC(樣品製備陽性對照),一個(ge) 是 NC(樣品製備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體(ti) 積跟每次製備要求的體(ti) 積一樣,以此作為(wei) PC。另外用水作為(wei) NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為(wei) RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體(ti) 係,在樣品製備室進行)
9. 如果做定量分析並且隻做1次重複,則標記N+9個(ge) PCR 管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的 N+2個(ge) 樣品,1個(ge) 用於(yu) PCR陰性對照(用水做模板),6個(ge) 用於(yu) 標準曲線。如果做定性分析,並且隻做1次重複,則標記N+4 個(ge) PCR管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的N+2個(ge) 樣品,1 個(ge) 用於(yu) PCR 陰性對照(用水做模板),1個(ge) 用於(yu) PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下麵隻以定量分析為(wei) 例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表隻列出一次重複。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照,並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chu) 存好後加)
廣藿香酮(標準品)(標準品)Human LPP ELISA Kit
(標準品)驅蟲斑鳩菊(標準品)Human LPIN2 ELISA Kit
(標準品)Human LPPR2 ELISA Kit
去甲斑蝥酸(標準品)Human LPXN ELISA Kit
去甲斑蝥酸鈉(標準品)Human LRAT ELISA Kit
去甲堿鹽酸鹽(標準品)Human LPIN2 ELISA Kit
旱蓮苷A去甲氧基薑黃素Human LRCH1 ELISA Kit
去甲氧基薑黃素(標準品)Human LPPR2 ELISA Kit
去甲氧基麻醉椒素Human LPP ELISA Kit
(標準品)去甲異波爾定(標準品)Human LMNB2 ELISA Kit
冬蟲夏草去甲澤拉木(標準品)Human LPXN ELISA Kit
17-戊酸酯,戊酸去芹菜糖桔梗皂苷D(標準品)Human LMF2 ELISA Kit
17-戊酸酯,戊酸去芹糖桔梗皂苷D3Human LRAT ELISA Kit
戊酸(標準品)去氫厄弗酚Human LRCH1 ELISA Kit
,酸去氫二異(標準品)Human LIN7A ELISA Kit
幼蟲芽孢杆菌探針法PCR熒光定量試劑盒突觸蛋白2(SYNPO2)(酶聯免疫吸附試驗法)磷酸酶抑製劑複合物 II 10x 質量規格:>95%,進分
角膜蛋白(KERA)(酶聯免疫吸附試驗法)過硫酸鈉 質量規格:>98.5%
正五聚蛋白3(PTX3)(酶聯免疫吸附試驗法)1 M Tris-緩衝(chong) 液,pH 9.5, 滅菌 質量規格:>99%
中間α-球蛋白抑製因子H5(ITIH5)(酶聯免疫吸附試驗法)10 x Tris-TAPS-EDTA Buffer 質量規格:>99%,標準品
中間α-球蛋白抑製因子H2(ITIH2)(酶聯免疫吸附試驗法)6 x Glycerol Gel Loading Dye I (BPB) 質量規格:>97%,BR
中間α-球蛋白抑製因子H1(ITIH1)(酶聯免疫吸附試驗法)腺苷脫氨酶(15U/mg) 質量規格:提取含量5%以上
CD72分子(CD72)(酶聯免疫吸附試驗法)阿脲 質量規格:>98.0% (LC&T),標準品
血漿過氧化物酶(GPX3)(酶聯免疫吸附試驗法)丁二水(>98%,USP) 質量規格:>98%