綜合微生物的培養(yang) 方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)製備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配製培養(yang) 材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yang) ;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yang) ;
(5)分離並檢測;
(6)取液儲(chu) 存;通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強,培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
規格參數:
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
阿薩斯絲(si) 孢酵母 | Trichospor | EY-J963511 |
資源名稱: 阿薩斯絲(si) 孢酵母
種屬: Trichosporon asahii
提供形式: 凍幹物
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yang) 基: YM 培養(yang) 基:酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾水1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2
生長條件: 25℃,好氧
存儲(chu) 條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍幹燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個(ge) 月,若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個(ge) 月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中,密封於(yu) 安瓿管內(nei) ,然後控製冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置於(yu) -150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) :
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基,培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1%,氮源不超過0.5%),碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境,不利於(yu) 放線菌孢子的形成,氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下,幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃,少數為(wei) 37 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 5~14天。
⑵ 黴菌孢子的製備
黴菌的孢子培養(yang) ,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖,而且這類培養(yang) 基的表麵積較大,可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25~28 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 4~14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*,並易被菌體(ti) 分解利用,氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃,子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備
種子罐種子製備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中,經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ,這樣的種子稱為(wei) 一級種子,把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ,經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ,這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子,將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為(wei) 四級發酵。
Tyomyces│sp. 中文名稱:幹酪菌Tyomyces│sp.提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:14生長條件:25℃ 純度:96%
Thermoanaerobacr│cellulolyticus 中文名稱:解纖維素熱厭氧杆菌Thermoanaerobacr│cellulolyticus分離基物:溫泉提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:高溫厭氧分解纖維素培養(yang) 方法培養(yang) 基:484生長條件:65℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:96%
Arthrobacr│sulfonivorans 中文名稱:食碸節杆菌Arthrobacr│sulfonivorans分離基物:土壤樣品提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:33生長條件:20℃存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法;礦物油法 純度:98%
Corynebacrium│pseudodiphtheriticum 中文名稱:類白喉棒杆菌Corynebacrium│pseudodiphtheriticum分離基物:土壤提供形式:斜麵培養(yang) 物模式菌株:no應用領域:檢測、培養(yang) 方法培養(yang) 基:2生長條件:30-37℃存儲(chu) 條件:真空冷凍幹燥法 純度:98%
Roseomonas│cervicalis 中文名稱:頸玫瑰單胞菌Roseomonas│cervicalis分離基物:石油汙染土提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:以菲、蒽、芴作為(wei) 碳源生長培養(yang) 方法培養(yang) 基:2生長條件:30℃存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:98%
Pseudomonas│syringae pv.theae 中文名稱:丁香假單胞菌茶致病變種Pseudomonas│syringae pv.theae分離基物:土壤樣品提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:33生長條件:20℃存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法;礦物油法 純度:
Bacillus│muralis 中文名稱:壁芽孢杆菌Bacillus│muralis分離基物:土壤樣品提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:33生長條件:20℃存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法;礦物油法 純度:99%
Rhodococcus│zopfii 中文名稱:佐氏紅球菌Rhodococcus│zopfii分離基物:土壤提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在無機鹽培養(yang) 基:中以100mg/L的酚為(wei) 碳源培養(yang) ,24h內(nei) 對100mg/L的酚降解率99%培養(yang) 方法培養(yang) 基:2生長條件:28℃存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:99%
阿薩斯絲(si) 孢酵母GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser) 兔抗粘附多肽抗體(ti) 王不留行FMOC-L-β-高亮氨Human MPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit
GPR30 G蛋白偶聯受體(ti) 30抗體(ti) 牛膽Fmoc-3-L-氨基丁Human FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit
gremlin 骨形態形成蛋白拮抗蛋白抗體(ti) Fmoc-L-beta-高異亮氨Human FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit
GnRHR 釋放激素受體(ti) 抗體(ti) 火麻仁Fmoc-L-beta-高苯氨Human FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit
GRP75 G蛋白偶聯受體(ti) 75抗體(ti) 石菖蒲噻吩-2-頻哪酯Human FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit
GPA/GYPA/CD235a 血型糖蛋白A(涎糖蛋白)抗體(ti) 土荊皮(金錢鬆)噻吩-2-頻哪酯Human FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit
GPR78 G蛋白偶聯受體(ti) 78抗體(ti) 百合噻吩-2-頻哪酯Human FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) ELISA Kit
KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯受體(ti) 54抗體(ti) 肉蓯蓉2-乙基苯肼 鹽鹽Human VLA (Very Late Appearing Antigen) ELISA Kit
資源名稱: 沼澤紅假單胞菌(菌液)
種屬: Rhodopseudomonas palustris
提供形式: 僅(jin) 提供菌液
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 研究;。應用於(yu) 番茄紅素、水質淨化和作為(wei) 飼料添加劑等方麵。
培養(yang) 基: 112 Van Niel's Yeast Agar:K2HPO4 1.0 g,MgSO4 0.5 g,酵母提取物 10.0 g,蒸餾水 1000 ml,pH 7.0-7.2。121℃,15min。
生長條件: 30℃,厭氧,在鎢絲(si) 燈下培養(yang)
生長特性: 光合細菌
存儲(chu) 條件: 2-8℃。
產(chan) 品名稱 | 沼澤紅假單胞菌(菌液)價(jia) 格 |
英文名稱 | Rhodopseudomonas palustris |
貨號 | EY-J963214 |
公司代理ATCC菌種,質量保證,為(wei) 大中型科研提供嚴(yan) 格質量體(ti) 係控製的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
菌種的培養(yang) :
1、菌種是指食用菌菌絲(si) 體(ti) 及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為(wei) 母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(ye) 發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和複篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子製備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yang) 成為(wei) 具有一定數量和質量的純菌種的製備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體(ti) 量及合成產(chan) 物之用。
3、種子製備包括孢子製備和菌絲(si) 體(ti) 製備菌種製備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續挑取少許,接入瓊脂斜麵培養(yang) 基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yang) 5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表麵積的固體(ti) 培養(yang) 基以獲得更多孢子(對於(yu) 黴菌類孢子製備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yang) 基)。
5、將培養(yang) 成熟的斜麵孢子製成懸浮液,接種到扁瓶固體(ti) 培養(yang) 基上,於(yu) 25~28℃培養(yang) 14天。將成熟的扁瓶孢子於(yu) 真空中抽幹,使水分降至10%以下,並放入 4℃冰箱中備用。一次製得的孢子瓶可在上延續使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chan) 孢子,如赤黴素產(chan) 生菌或產(chan) 孢子不多的,則可采用搖瓶液體(ti) 培養(yang) 製得菌絲(si) 體(ti) ,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲(si) 體(ti) 迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體(ti) 。其中的培養(yang) 基組分應是易於(yu) 被菌體(ti) 利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為(wei) 發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲(si) 粗壯,無雜菌及異常菌體(ti) 。接種量一般在10%~20%。
培養(yang) 及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦淨安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢複培養(yang) :用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體(ti) 培養(yang) 基,滴入安瓿管內(nei) ,輕輕振蕩,使凍幹菌體(ti) 溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體(ti) 懸浮液,移植於(yu) 1-2支建議的培養(yang) 基試管中,並在建議的條件下培養(yang) 。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環境下,某些菌種經過冷凍幹燥保存後,延遲期較長,需要連續兩(liang) 次繼代培養(yang) 才能正常生長
4、複蘇後的菌種在傳(chuan) 1-2代後使用。
5、暫不啟開的安瓿及複蘇後需保藏的斜麵應於(yu) 4℃中保藏。
Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel. 中文名稱:杏鮑菇(斜麵)Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel.提供形式:試管斜麵安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧 純度:97%
Shigellaflexneri 中文名稱:福氏誌賀氏菌Shigellaflexneri安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:2 純度:≥99%
嗜冷芽孢杆菌 中文名稱:Bacilluspsychrophilus=Sporosarcinapsychrophila嗜冷芽孢杆菌分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chan) 冷激蛋白培養(yang) 方法培養(yang) 基:2、121生長條件:15℃ 純度:98%
Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei 中文名稱:類幹酪乳杆菌類幹酪亞(ya) 種Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei分離基物:奶類製品。安全等級:1模式菌株:no應用領域:模式菌株培養(yang) 方法培養(yang) 基:58生長條件:37℃ 純度:98%
Acinetobacrvenetianus 中文名稱:威尼斯不動杆菌Acinetobacrvenetianus分離基物:海灘上焦油安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:2生長條件:30℃ 純度:97%
Arthrobacrwoluwensis 中文名稱:ArthrobacrwoluwensisArthrobacrwoluwensis分離基物:人血安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:109生長條件:37℃ 純度:97%
Streptomycesthermoviolaceussubsp.thermoviolaceus 中文名稱:熱紫鏈黴菌熱紫亞(ya) 種Streptomycesthermoviolaceussubsp.thermoviolaceus分離基物:新鮮的馬和豬的糞便的混合物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:162163生長條件:37-45℃ 純度:β-型, >90.0%(T)
Campylobacr jejuni 中文名稱:空腸彎曲菌Campylobacr jejuni提供形式:凍幹物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質量控製。研究、質量控製,《GB/T 4789.9-2014空腸彎曲菌檢驗》陽性對照菌株,《GB 4789.28 培養(yang) 基:和試劑的質量要求》標準菌株。培養(yang) 方法培養(yang) 基:布氏肉湯:胰蛋白腖 10.0g,蛋白腖 10.0g,葡萄糖 1.0g ,酵母浸膏 2.0g 5.0g,亞(ya) 氫鈉(NaHSO3) 0.1g,蒸餾 1000mL。將各成分溶於(yu) 蒸餾中。121℃高壓滅菌15min。終pH7.0.。FBP濃原液:亞(ya) 鐵(FeSO4) 2.5g ,焦亞(ya) 鈉(Na2S2O5) 2.5g,鈉(sodium pyruva) 2.5g;將各成分溶於(yu) 100mL蒸餾中,經0.20μm濾膜過濾除菌,存於(yu) 4℃。每100mL經滅菌的基礎液中加1mL,混勻。(注:如實驗需要可加入1號抗生素液和2號抗生素液)。1號抗生素溶液: 0.75 g,氧苄氨嘧乳鹽(trimethoprimlacta) 0.38g , 250 000 IU 將各成分溶於(yu) 500mL蒸餾中,經0.20μm濾膜過濾除菌。每100mL經滅菌的基礎液中加1Ml。2號抗生素溶液:(rifampicin) 0.2g,氧苄氨嘧乳鹽 0.2g, 200 000 IU,(actidione) 2.0g 。將各成分置200mL容量瓶中,加入95%乙醇50mL,振搖使溶解,加入蒸餾至200mL。過濾除菌,每100mL經高壓滅菌的基礎液中加1mL。傳(chuan) 代方法①凍幹管:75%酒精擦拭管壁,後用砂輪在凍幹管壁劃兩(liang) 圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yang) 基:充分溶解,平板塗布,活化培養(yang) 。 ②斜麵:試管口用75%酒精擦拭後,火焰灼燒,後用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜麵,培養(yang) 。生長條件:37℃,微需氧。生長特性G-輕度彎曲杆菌,氧化酶、接觸酶陽性,尿素酶陰性,42℃生長,25℃不生長,馬尿鹽解試驗陽性,不發酵糖類。微需氧,適溫度為(wei) 37~42℃。存儲(chu) 條件:2-8℃。真空冷凍幹燥法 純度:β-型, >90.0%(T)
沼澤紅假單胞菌(菌液)價(jia) 格假單胞F瓊脂人神經細胞 原代腎實質細胞特製基礎無血清培養(yang) 基Protein A 蛋白A
假單胞P瓊脂人神經細胞 原代骨細胞特製基礎無血清培養(yang) 基GST-Tag protein 重組-轉移酶
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)人神經細胞 原代滑膜皮細胞特製基礎無血清培養(yang) 基Cholesterol
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)人小腦顆粒細胞 原代骨骼肌細胞特製基礎無血清培養(yang) 基Beta-Amyloid(1-16) β澱樣肽1-16(多肽蛋白)
EC肉湯人海馬趾神經細胞 原代神經元細胞特製基礎無血清培養(yang) 基Beta-Amyloid (31-35) β澱樣肽31-35(多肽蛋白)
EC肉湯人少突膠質前體(ti) 細胞-貼壁生長 原代神經膠質細胞特製基礎無血清培養(yang) 基Beta-Amyloid(1-28) β澱樣肽1-28(多肽蛋白)
伊紅美藍瓊脂(EMB)人少突膠質前體(ti) 細胞-懸浮生長 原代單核細胞特製基礎無血清培養(yang) 基Beta-Amyloid(1-40) β澱樣肽(1-40)(多肽蛋白)
伊紅美藍瓊脂(EMB)人少突膠質細胞 原代軟骨細胞特製基礎無血清培養(yang) 基A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β澱樣肽1-40
實驗內(nei) 容:
1.稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包紮→滅菌→無菌檢查
2.幹熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌