公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
非洲綠猴腎細胞係/HCV-C;Vero-HCV-C | 貼壁生長 | EY-X63658 |
細胞名稱 非洲綠猴腎細胞係/HCV-C;Vero-HCV-C
形態特性: 上皮樣細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: Vero-HCV-C細胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能穩定表達C蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室於(yu) 2008年構建並保存。
培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,2-3天傳(chuan) 一代
傳(chuan) 代情況: C25
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Paniculidine C
CAS No.:97399-95-6
中文名:
分子式:C13H17NO
庚;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 類固5α還原酶2(SRD5α2) 規格: 0.1g
代鋅;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 類固5α還原酶2(SRD5α2) 規格: 0.25g
啶對照品;有報告 訂購|谘詢 類固生成因子1(SF1) 規格: 100mg
L穀;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 類固合成急性調節蛋白(STAR) 規格: 0.1g
煙酰;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 類(TPS) 規格: 0.25g
箭藿苷A 訂購|谘詢 類(TPS) 規格: HPLC≥98%;5mg
瓜子金皂苷V 訂購|谘詢 類(TPS) 規格: HPLC≥95%;20mg
桔梗皂苷D2 訂購|谘詢 類(TPS) 規格: HPLC≥98%;20mg
介芬 訂購|谘詢 類(TPS) 規格: HPLC≥98%;20mg
育亨賓 訂購|谘詢 類(TPS) 規格: HPLC≥98%;20mg
(+)鬆蘿 訂購|谘詢 類β2(TPSβ2) 規格: HPLC≥98%;20mg
白藜蘆 訂購|谘詢 類γ1(TPSγ1) 規格: HPLC≥98%;20mg
格列 訂購|谘詢 類δ1(TPSδ1) 規格: HPLC≥98%;20mg
突厥 訂購|谘詢 類脂肪酶A(LPHA) 規格: HPLC≥98%;20mg
水甘草 訂購|谘詢 類粘蛋白2(ORM2) 規格: HPLC≥98%;20mg
1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購|谘詢 前B淋巴細胞基因1(VPREB1) 規格: HPLC≥98%;10mg
毛地黃素 訂購|谘詢 前B淋巴細胞基因3(VPREB3) 規格: HPLC≥98%;20mg
雷帕 訂購|谘詢 前動力蛋白2(PK2) 規格: HPLC≥98%;20mg
AMBP/Alpha 1 microglobulin α1微球蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Glyburide/Gliebenclamide
A2BP1/Fox1 共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Glyburide/Gliebenclamide
RLLM1/C14orf166 胰腺癌轉移相關(guan) 蛋白RLLM1抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Glimepiride
ABC2/C17orf71 癌增強蛋白2抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Glimepiride
CA8 酶相關(guan) 蛋白8抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Griseofulvin;Fulcin
CAB1 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Griseofulvin
CDK5RAP3 周期素依賴性激酶5激活結合蛋白C53抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Sodium hyaluronate
CENPH 著絲(si) 粒蛋白H抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Hydrocortisone
銀 進口、國產(chan) 英文名稱:Silverchloride 含量:BR,97%
磺酚S 進口、國產(chan) 英文名稱:ChlorosulphonphenolS 含量:CP
甲基樹脂 進口、國產(chan) 英文名稱:Merrifieldresin 含量:BR
甲芴基甲酯 進口、國產(chan) 英文名稱:FMOCC1 含量:BR,99%
甲甲基酯 進口、國產(chan) 英文名稱:CBZCL 含量:BR,98%
亞(ya) 鉑鉀 進口、國產(chan) 英文名稱:Potassiumchloroplatinite 含量:FGC,98.5%
亞(ya) 銠銨 進口、國產(chan) 英文名稱:Ammoniumhexachloroplatinate(IV) 含量:AR,86.8%
亞(ya) 明T 進口、國產(chan) 英文名稱:ChloramineTtrihydrate 含量:超純,99%
酰 進口、國產(chan) 英文名稱:2Chloroeth* 含量:高純
青 進口、國產(chan) 英文名稱:Cloxacillinsodiumsalthydrate 含量:高純,916ug/mg
非洲綠猴腎細胞係/HCV-C;Vero-HCV-C凍幹兔血漿規格:0.5ml*10用途:用於(yu) 金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(GB、SN標準)。
瑞氏染色液規格:5ml/支*8用途:用於(yu) 細菌瑞氏染色
吐溫稀釋液規格:250g用途:用於(yu) 樣品製備水稀釋
UVM培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 李氏菌的增菌培養(yang)
1/2B5培養(yang) 基(不含瓊脂和蔗糖)規格:250g用途:用於(yu) 植物組織培養(yang) (不含瓊脂和蔗糖)
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒規格:300ml/袋*10用途:用於(yu) 大腸菌群、大腸杆菌的測定(GB、SN標準)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。