細胞名稱 乳腺癌細胞;BC-021
形態特性: 上皮樣細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: BC-021乳腺癌細胞由中國人種乳腺癌組織經培養(yang) 選擇獲得,於(yu) 2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎研究和臨(lin) 床研究的材料。
培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,2-3天傳(chuan) 一代
傳(chuan) 代情況: C31
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
乳腺癌細胞;BC-021 | 貼壁生長 | EY-X63671 |
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
Scholaricine
CAS No.:99694-90-3
中文名:
分子式:C20H24N2O4
五味子對照品;有報告 訂購|谘詢 神經肽Y受體(ti) Y5(NPY5R) 規格: 20mg
D棉籽糖;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 神經肽Y受體(ti) Y5(NPY5R) 規格: 0.25g
維生素B2;純品型;標準品;有證書(shu) 訂購|谘詢 神經降壓素(NT) 規格: 0.25g
10氧基喜樹 訂購|谘詢 神經降壓素(NT) 規格: HPLC≥98%;20mg
Cimiracemoside D 訂購|谘詢 神經降壓素受體(ti) 2(NTSR2) 規格: HPLC≥98%;20mg
苦參新 F 訂購|谘詢 神經細胞黏附分子(NCAM) 規格: HPLC≥98%;20mg
美商陸 訂購|谘詢 神經型一氧合酶(*) 規格: HPLC≥98%;20mg
紫杉C 訂購|谘詢 神經型一氧合酶(*) 規格: HPLC≥98%;20mg
7木糖苷10脫基紫杉 訂購|谘詢 神經型一氧合酶(*) 規格: HPLC≥40%;20mg
氧白藜蘆 訂購|谘詢 神經型一氧合酶(*) 規格: HPLC≥98%;20mg
羅格列 訂購|谘詢 神經鈣蛋白δ(NCALδ) 規格: HPLC≥98%;20mg
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雙草 訂購|谘詢 神經突蛋白1(NRN1) 規格: HPLC≥98%;20mg
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2金剛 訂購|谘詢 神經酶(NEU) 規格: HPLC≥98%;20mg
非洲防己 訂購|谘詢 神經秩蛋白(NRTN) 規格: HPLC≥98%;20mg
CRHR2 促腎上腺皮質釋放激素受體(ti) 2抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Tolazoline HCl
CHX10 CHX10蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Tolterodine Tartrate
Glycophorin C/CD236 糖蛋白C抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Tolterodine Tartrate
Frizzled 2 Wnt信號受體(ti) FZD2蛋白抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Topiramate
IHH HHG2抗體(ti) 現貨供應 0.2ml Topiramate
Insig2 胰島素誘導基因2抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Tozasertib,VX680/MK0457
MCHR/GPR24 G蛋白偶聯受體(ti) 24抗體(ti) 現貨供應 0.1ml Trospium chloride
PSMC1/Proteasome 19S S4 26S蛋白酶調節亞(ya) 型抗體(ti) 現貨供應 0.1ml AG014699
皮脂酯 進口、國產(chan) 英文名稱:Diethylsebacate 含量:GCS
皮質甾 進口、國產(chan) 英文名稱:Corticosterone 含量:CP,99%
偏高 進口、國產(chan) 英文名稱:Sodiumperiodate 含量:BR,99%
偏鋯 進口、國產(chan) 英文名稱:Zirconiumhydroxide 含量:3N,200目
偏矽鈣 進口、國產(chan) 英文名稱:Calciumsilicate 含量:CP,98%
偏矽鉀 進口、國產(chan) 英文名稱:Potassiumsilicate 含量:GR,99%
偏矽 進口、國產(chan) 英文名稱:Sodiummetasilicatenonahydrate 含量:CP,70%
偏六 進口、國產(chan) 英文名稱:Sodiumhexametaphoshpate 含量:AR,99%
偏鋁 進口、國產(chan) 英文名稱:Sodiumaluminate 含量:工藝級
偏硼鋰 進口、國產(chan) 英文名稱:Lithiummetaborateoctahydrate 含量:4N,10000目,99.99%
乳腺癌細胞;BC-021動力培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 動力試驗
0.66mg規格:0.66mg*5用途:添加於(yu) 200ml卵黃雙抗培養(yang) 基(EPV)或液體(ti) 雙抗增菌液中
革蘭(lan) 氏陰性菌(G-)選擇性培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 革蘭(lan) 氏陰性菌的選擇性培養(yang)
大腸杆菌/大腸菌群液體(ti) 顯色培養(yang) 基規格:1000ml用途:用於(yu) 快速、準確同時檢測大腸杆菌和大腸菌群,培養(yang) 24小時,大腸杆菌顯藍色熒光,大腸菌群顯藍色
CIN-1瓊脂平板(9cm)規格:10個(ge) /包用途:用於(yu) 分離小腸結腸炎耶爾森氏菌
GN增菌培養(yang) 基規格:BR250g詳情介紹