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星空体育官网站   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
 
產品名稱:
腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
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產品報價:
產品特點:
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  腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R的詳細資料:

公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:

產(chan) 品名稱

生長特性

貨號

腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R

貼壁生長

EY-X63409

細胞名稱  腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞係源於(yu) 多能腎上腺皮質癌細胞係NCI-H295,後者由GazdarAF等建立,從(cong) 腎上腺皮質的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經改變培養(yang) 條件獲得了NCI-295R細胞,群體(ti) 倍增時間從(cong) 原來的5天減為(wei) 2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產(chan) 生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。

培養(yang) 條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)Nu-SerumI,2.5%;15mMHEPES+0.00625mg/mlinsulin+0.00625mg/mltransferrin+6.25ng/mlselenium+1.25mg/mlbovineserumalbumin+0.00535mg/mllinoleicacid

傳(chuan) 代方法: 1:3~1:4傳(chuan) 代;每周換液2~3次。

傳(chuan) 代情況: C3

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 培養(yang) 法(-)

冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
雜交瘤細胞株;Fi-14F1形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-DMP1 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;2B5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SLC30A2 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;1D7形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-NRBF2 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;4B7形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-CASP1 Polyclonal Antibody

GY-PCV2-PK15細胞株;GY-PCV2-PK15形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Alexa Fluor 488標記的羊抗豚鼠IgG

雜交瘤細胞株;8F9H3形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-MYH1 Polyclonal Antibody

抗人CD146雜交瘤細胞株;4-F10(IgG1)形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長PE-CY5標記的小鼠抗兔IgM

雜交瘤細胞株;5B8形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長辣根過氧化物酶標記的小鼠抗大鼠IgG

雜交瘤細胞株;5D9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgG

雜交瘤細胞株;8H7形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-YY1AP1 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;STMN1-3P9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SOCS2 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;P24-3B9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-Epsilon Tubulin  Monoclonal Antibody

雜交瘤細胞株;P24-2F4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長PE-Cy3標記的兔抗羊IgM

雜交瘤細胞株;NGAL-4F6形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-NKAP Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;NGAL-3B5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-LIG4 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;1A4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長PE標記的兔抗豚鼠IgM
腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒ICAELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒ICAM-1/CD54ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

兔纖溶抑製因子/激活的纖溶抑製物(TAFI)ELISA試劑盒ICAM-1/CD54ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

兔纖溶酶抗纖溶酶複合物(PAP)ELISA試劑盒ICAM-1ELISAKIT產(chan) 品規格:48T/96T。

兔抗內(nei) 皮細胞抗體(ti) (AECA)ELISA試劑盒ICAM-1ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

兔抗平滑肌抗體(ti) (ASMA)ELISA試劑盒ICAM-1ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

兔氧化低密度脂蛋白抗體(ti) (OLAb)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

兔抗單核細胞抗體(ti) (AMA)ELISA試劑盒ICAM-2ELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。

 

產品相關關鍵字: 腎上腺皮質 NCI-H295R
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