綜合微生物的培養(yang) 方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)製備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配製培養(yang) 材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yang) ;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yang) ;
(5)分離並檢測;
(6)取液儲(chu) 存;通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強,培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
規格參數:
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乳酸片球菌規格 | Pediococcus acidilactici | EY-J963215 |
資源名稱: 乳酸片球菌
種屬: Pediococcus acidilactici
分離基物: 發酵犛牛乳
提供形式: 凍幹物
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 酸奶
培養(yang) 基: MRS培養(yang) 基:酪腖 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g, 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。
生長條件: 37℃,兼性厭氧,3d
存儲(chu) 條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍幹燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個(ge) 月,若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個(ge) 月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中,密封於(yu) 安瓿管內(nei) ,然後控製冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置於(yu) -150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) :
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基,培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1%,氮源不超過0.5%),碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境,不利於(yu) 放線菌孢子的形成,氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下,幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃,少數為(wei) 37 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 5~14天。
⑵ 黴菌孢子的製備
黴菌的孢子培養(yang) ,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖,而且這類培養(yang) 基的表麵積較大,可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25~28 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 4~14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*,並易被菌體(ti) 分解利用,氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃,子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備
種子罐種子製備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中,經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ,這樣的種子稱為(wei) 一級種子,把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ,經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ,這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子,將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為(wei) 四級發酵。
Serratia liquefaciens 中文名稱:液化沙雷氏菌Serratia liquefaciens提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:分類學研究,質量控製培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0002生長條件:30℃存儲(chu) 條件:真空冷凍幹燥法 純度:≥98% (HPLC)
Aspergillus nigerCMCC(F) 98003 中文名稱:黑曲黴 Aspergillus nigerCMCC(F) 98003模式菌株:未知應用領域:0.5~1.0×10³cfu/顆 1顆/支 純度:≥98% (HPLC)
Cryptococcus│albidus 中文名稱:淺白隱球酵母Cryptococcus│albidus分離基物:複合飼料提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:飼料用。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0077生長條件:28-30℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:97%
Torulopsis│globosa 中文名稱:球擬圓酵母Torulopsis│globosa提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用酵母。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0077生長條件:28-30℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:97%
Candida│gelidadi 中文名稱:凍膠假絲(si) 酵母Candida│gelidadi分離基物:酒曲提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用於(yu) 曲酒增香。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0077生長條件:28-30℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:97%
Torulopsis│dattila 中文名稱:棗椰球擬酵母Torulopsis│dattila提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:以糖蜜為(wei) 原料發酵酒精。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0077生長條件:28-30℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:97%
Saccharomyces│chevalieri 中文名稱:薛瓦酵母Saccharomyces│chevalieri分離基物:蘋果李子提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:釀造李子酒。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0077生長條件:28-30℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:95%
Candida│lipolytica var. lipolytica 中文名稱:解酯假絲(si) 酵母解酯變種Candida│lipolytica var. lipolytica提供形式:斜麵培養(yang) 物安全等級:1模式菌株:no應用領域:石油發酵製檸檬及異檸檬。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0077生長條件:28-30℃存儲(chu) 條件:定期移植法 純度:95%
乳酸片球菌規格營養(yang) 肉湯(NB)人星形膠質細胞原代上皮細胞特製基礎培養(yang) 基A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β澱樣肽1-40(結構改造)
營養(yang) 肉湯(NB)人星形膠質細胞原代內(nei) 皮細胞特製基礎培養(yang) 基A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β澱樣肽29-40(野生型)
營養(yang) 瓊脂(NA)人星形膠質細胞原代平滑肌細胞特製基礎培養(yang) 基A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β澱樣肽29-42(野生型)
營養(yang) 瓊脂(NA)人小腦星形膠質細胞原代成纖維細胞特製基礎培養(yang) 基Beta-Amyloid (1-42) β澱樣肽(1-42)
乳糖膽鹽發酵培養(yang) 基人脊髓星形膠質細胞原代心肌細胞特製基礎培養(yang) 基Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β澱樣肽25-35(多肽)
乳糖膽鹽發酵培養(yang) 基人海馬星形膠質細胞原代表皮角化細胞特製基礎培養(yang) 基Beta-Amyloid 1-42 CT β澱樣肽 1-42 (C端多肽)
乳糖複發酵培養(yang) 基(乳糖發酵培養(yang) 基)人腦幹星形膠質細胞原代係膜細胞特製基礎培養(yang) 基Amylin 糖尿病相關(guan) 肽(胰島澱樣肽)
乳糖複發酵培養(yang) 基(乳糖發酵培養(yang) 基)人中腦星形膠質細胞原代肝實質細胞特製基礎培養(yang) 基APP695-770 (Amyloid protein precursor) 澱樣肽前體(ti) 蛋白(多肽抗原)