公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

細胞名稱  SV40T轉化的胚腎細胞；293T
形態特性   上皮樣　
生長特性  貼壁生長　
特征特性   表達SV40大T抗原，可用於(yu) 轉染和作為(wei) 包裝細胞；用於(yu) 瞬時轉染時可高表達AP融合蛋白。 
培養(yang) 條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　
傳(chuan) 代方法   1:4~8傳(chuan) 代；26~36小時1次
傳(chuan) 代情況  C5
凍存條件   基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS　
支原體(ti) 檢測  培養(yang) 法（-）　

冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。

Anti-Apo-E    載脂蛋白E抗體(ti)  0.1ml
Anti-APP695/770   澱粉樣肽前體(ti) 蛋白抗體(ti)  0.1ml
Anti-AQP-2   水通道蛋白-2抗體(ti)  0.1ml
Anti-AQP-3   水通道蛋白-3抗體(ti)  0.1ml
Anti-AQP4   水通道蛋白-4抗體(ti)  0.1ml
Anti-AR   雄激素受體(ti) 抗體(ti)  0.1ml
Anti-ARC    ARC抗體(ti)  0.2ml
Anti-ARF6    ADP核糖基化因子6抗體(ti)  0.2ml
Anti-Aromatase P450   芳香化酶/細胞色素P450/P450抗體(ti)  0.1ml
anti-ARIP2a   激活素受體(ti) 2A/激活素受體(ti) 相互作用蛋白2a抗體(ti)  0.1ml
anti-β-arrestin 1/2   β-抑製蛋白1/2抗體(ti)  0.1ml
anti-ARIP2B   激活素受體(ti) 2B/激活素受體(ti) 相互作用蛋白2b抗體(ti)  0.2ml
Anti-ART   膠質細胞係源性神經營養(yang) 因子GDNF的一種抗體(ti)  0.1ml
Anti-ARα1   α1腎上腺素能受體(ti) 抗體(ti)  0.1ml
Anti-ASCL1/MASH1    神經母細胞特異性轉移因子抗體(ti)  0.1ml
anti-ASPP1   p53凋亡刺激蛋白1抗體(ti)  0.1ml
anti-ASPP2   P53凋亡刺激蛋白2  0.1ml
Anti-AT/AGT   血管緊張素原抗體(ti)  0.1ml
Anti-AT1R   血管緊張素Ⅱ-1型受體(ti) 抗體(ti)  0.2ml
Anti-ATF1    活化複製因子1抗體(ti)  0.1ml
Anti-ATF2    活化複製因子2抗體(ti)  0.2ml
Anti-ATF3    活化轉錄因子3抗體(ti)  0.2ml
Anti-B7-H1/PDL1/CD274   程序性死亡配體(ti) 1抗體(ti)  0.1ml
Anti-B7-H4    B7H4抗體(ti)  0.2ml
Anti-BACE/ASP2    β分泌酶抗體(ti)  0.1ml
Anti-Bad    相關(guan) 死亡促進因子Bad抗體(ti)  0.1ml
anti-Bak   Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體(ti)  0.1ml
Anti-BADH2    BADH2抗體(ti)  0.1ml

人(TP-5)elisa試劑盒 Human Thymopentin, TP-5 Elisa Kit 96T/48T
人(Thymosin)elisa試劑盒 Human Thymosin Elisa Kit 96T/48T
人未磷酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1elisa試劑盒  Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)elisa試劑盒 Human parathyroid hormone-like protein, PLP Elisa Kit 96T/48T
人內(nei) 脂素/內(nei) 髒脂肪素(visfatin)elisa試劑盒 Human visfatin Elisa Kit  96T/48T
人apelin 12(AP12)ELISA Ki Human apelin 12, AP12 Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa試劑盒 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide, GIP Elisa Kit 96T/48T
人胰島素原(PI)elisa試劑盒 Human Proinsulin, PI Elisa Kit 96T/48T
人胰島素受體(ti) β(ISR-β)elisa試劑盒 Human Insulin Receptor β, ISR-β Elisa Kit 96T/48T
人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)elisa試劑盒 Human Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa Kit 96T/48T
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒 Human ghcagons-like pepfide 1, GLP-1 Elisa Kit 96T/48T
人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)elisa試劑盒 human thyroid stimulating immunoglobulin, TSI Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素(PTH)elisa試劑盒 human Parathyroid hormone, PTH Elisa Kit 96T/48T
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa試劑盒 human Prostaglandin D2-methoxime, PGD2-MOX Elisa Kit 96T/48T
人高敏甲狀腺素(u-T4)elisa試劑盒 human Ultrasensitivity Thyroxine, u-T4 Elisa Kit 96T/48T
SV40T轉化的胚腎細胞；293T人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)elisa試劑盒 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone, U-TSH Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺(DA)elisa試劑盒 human dopamine, DA Elisa Kit 96T/48T
人(AZT)elisa試劑盒 human Azidothymidine, AZT Elisa Kit 96T/48T
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。