人原代椎間盤髓核原代細胞
商品屬性：

形態：梭形、多角形細胞樣，貼壁生長

培養(yang) 基：人椎間盤髓核專(zhuan) 用培養(yang) 基

培養(yang) 環境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳(chuan) 代特征：可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

細胞基本屬性：

種屬來源人

組織來源椎間盤組織

生長特性貼壁生長

形態特征梭形、多角形細胞樣

產(chan) 品規格5x105cells/T25或1mL凍存管

培養(yang) 基人椎間盤髓核專(zhuan) 用培養(yang) 基

培養(yang) 條件氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

換液頻率每2-3天換液一次

消化液0.25%

產(chan) 品貨期現貨，1周左右

運輸方式T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹人椎間盤髓核采用膠原酶混合消化法並結合軟骨細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來。人椎間盤髓核分離椎間盤組織；椎間盤是位於(yu) 脊柱兩(liang) 椎體(ti) 之間，分為(wei) 中央部的髓核，富於(yu) 彈性的膠狀物質；周圍部的纖維環，由多層纖維軟骨環按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨複蓋於(yu) 椎體(ti) 上，下麵骺環中間的骨麵。上下的軟骨板與(yu) 纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位於(yu) 髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環成為(wei) 堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體(ti) ，富於(yu) 彈性，為(wei) 椎間盤結構的一部分，位於(yu) 兩(liang) 軟骨板與(yu) 纖維環之間。由縱橫交錯的纖維網狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質。嬰幼兒(er) 時期的髓核含水量為(wei) 80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體(ti) 積大而鬆散，位於(yu) 椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中後部；在成年以前構成髓核的主要物質是大量蛋白多糖複合體(ti) 、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗並逐漸被纖維軟骨所替代。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：