人原代B淋巴原代細胞
商品屬性:

規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3249 |
種屬來源 | 人 | 組織來源 | 外周血 |
生長特性 | 懸浮生長 | 形態特征 |
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形態:
培養(yang) 基:人B淋巴細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
培養(yang) 環境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳(chuan) 代特征:可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態

細胞基本屬性:

種屬來源:人
組織來源:外周血外周血
生長特性:懸浮生長
產(chan) 品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
產(chan) 品貨期:3-4周
運輸方式:T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞(包郵)
供應限製:僅(jin) 限於(yu) 科學研究,絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用
背景介紹::B淋巴細胞的祖細胞存在於(yu) 胎肝的造血細胞島中,此後B淋巴細胞的產(chan) 生和分化場所逐漸被骨髓所代替。成熟的B細胞主要定居於(yu) 淋巴結皮質淺層的淋巴小結和脾髒的紅髓和白髓的淋巴小結內(nei) 。B細胞在抗原刺激下可分化為(wei) 漿細胞,漿細胞可合成和分泌抗體(ti) (免疫球蛋白),主要執行機體(ti) 的體(ti) 液免疫。
B細胞在骨髓內(nei) 分化各階段的主要變化為(wei) 免疫球蛋白基因的重排和膜表麵標誌的表達。B細胞在發育分化過程中,同樣也經曆選擇作用,以除去非功能性基因重排B細胞和自身反應性B細胞,形成周圍成熟的B細胞庫。B細胞表麵有多種膜表麵分子,識別抗原、與(yu) 免疫細胞和免疫分子相互作用,也是分離和鑒別B細胞的重要依據。B細胞表麵分子主要有白細胞分化抗原、MHC以及多種膜表麵受體(ti) 。

細胞培養(yang) 操作:

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang)
傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態
傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1:2傳(chuan) 代,1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿
傳(chuan) 代方法:
1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中,輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後,吸出多餘(yu) 消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後,再加入5ml培養(yang) 基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代,然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL,置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ;
4.待細胞貼壁後,培養(yang) 觀察;之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。
原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括:

一、剝離組織,去除外膜、結締組織等:將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出,並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。
二、洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊:使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織,然後將其剪成約1mm大小的小塊。
三、用0.1%~0.2%的消化:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩衝(chong) 液中,進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。
四、吹打分散後,過濾、計數:將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中,然後過濾、計數。
五、按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) :將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。
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