人原代軟骨原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：人

組織來源：關(guan) 節關(guan) 節

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產(chan) 品貨期：7-8周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:人軟骨細胞采用膠原酶-中性蛋bai酶聯合消化製備而來，人軟骨細胞分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細胞、基質及纖維構成。軟骨組織再生能力強，這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞，以後逐漸變為(wei) 軟骨母細胞，並形成軟骨基質，細胞被埋在軟骨陷窩內(nei) 而變為(wei) 靜止的軟骨細胞。根據軟骨組織內(nei) 所含纖維成分的不同，可將軟骨分為(wei) 透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結構也較典型。軟骨細胞（chondrocyte）位於(yu) 軟骨陷窩內(nei) 。幼稚的軟骨細胞位於(yu) 軟骨組織的表層，單個(ge) 分布，體(ti) 積較小，呈橢圓形，長軸與(yu) 軟骨表麵平行，越向深層的軟骨細胞體(ti) 積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個(ge) 成群分布於(yu) 軟骨陷窩內(nei) ，這些軟骨細胞由同一個(ge) 母細胞分裂增殖而成，稱為(wei) 同源細胞群。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內(nei) 有大量的粗麵內(nei) 質網和發達的高爾基複合體(ti) 及少量的線粒體(ti) 。在組織切片中，軟骨細胞收縮為(wei) 不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體(ti) 外培養(yang) 的軟骨細胞對於(yu) 研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義(yi) 。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：