人原代腎小球內(nei) 皮原代細胞

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：人

組織來源：腎髒腎髒

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產(chan) 品貨期：7-8周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:人腎小球內(nei) 皮細胞采用先機械研磨過不鏽鋼網篩分離得到腎小球、後用膠原酶消化，結合內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，人腎小球內(nei) 皮細胞分離自腎組織；腎髒是機體(ti) 的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體(ti) 內(nei) 代謝產(chan) 物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎髒同時還有內(nei) 分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素3、前列腺素、激肽等，又為(wei) 機體(ti) 部分內(nei) 分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎髒的這些功能，保證了機體(ti) 內(nei) 環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用於(yu) 將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢(cong) ，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nei) 的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nei) ，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之後，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nei) 。腎小球與(yu) 鮑氏囊合稱為(wei) 腎小體(ti) ，腎小球的過濾速率便稱為(wei) 腎小球過濾率。腎小球內(nei) 皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為(wei) 圓形、多角形，單層貼壁生長；細胞質豐(feng) 富，細胞核為(wei) 圓形或卵圓形。腎小球內(nei) 皮細胞被覆於(yu) 腎小球毛細血管壁腔側(ce) ，與(yu) 血流直接接觸，是腎小球濾過膜的道屏障，可粘附細菌和白細胞，修複基底膜，並有抗凝、抗血栓的作用；所以，體(ti) 外培養(yang) 的腎小球內(nei) 皮細胞在免疫學和病理生理學領域中具有重要的研究價(jia) 值。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

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