大鼠原代腹腔巨噬原代細胞

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：大鼠

組織來源：腹腔腹腔

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:大鼠腹腔巨噬細胞采用反複往腹腔注射培養(yang) 基並抽取的方法結合差速貼壁製備而來，大鼠腹腔巨噬細胞分離自腹腔；腹腔巨噬細胞分離自腹腔；腹腔，即軀幹腹部的腔，內(nei) 襯腹膜，由體(ti) 壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nei) 容納胃、肝、膽囊、脾髒、胰、腎髒、腸、闌尾、膀胱、泌尿係和婦科（子宮、附件）等其他內(nei) 髒器官。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便於(yu) 培養(yang) ，並可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yang) ，難以長期生存。巨噬細胞（Macrophages）是一種位於(yu) 組織內(nei) 的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源於(yu) 骨髓中的前體(ti) 細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為(wei) 吞噬細胞，在脊椎動物體(ti) 內(nei) 參與(yu) 非特異性防衛（先天性免疫）和特異性防衛（細胞免疫）。它們(men) 的主要功能是以固定細胞或遊離細胞的形式對細胞殘片及病原體(ti) 進行噬菌作用（即吞噬以及消化），並激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體(ti) 作出反應。巨噬細胞功能及其在疾病發生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一；腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防禦功能，兔腹腔巨噬細胞采用反複往腹腔注射培養(yang) 基並抽取的方法結合差速貼壁製備而來。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

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