大鼠原代肝竇內(nei) 皮原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：大鼠

組織來源：肝髒肝髒

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:大鼠肝竇內(nei) 皮細胞采用混合酶灌流消化、反複低速離心、密度梯度離心法，並通過內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，大鼠肝竇內(nei) 皮細胞細胞分離自肝髒組織；肝髒是身體(ti) 內(nei) 以代謝功能為(wei) 主的一個(ge) 器官，並在身體(ti) 裏麵起著去氧化、儲(chu) 存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝髒也製造消化係統中之膽汁。肝髒是機體(ti) 內(nei) 髒裏最大的器官，位於(yu) 機體(ti) 中的腹部位置，在右側(ce) 橫隔膜之下，位於(yu) 膽囊之前端且於(yu) 右邊腎髒的前方，胃的上方。肝髒是機體(ti) 消化係統中最大的消化腺，為(wei) 一紅棕色的V字形器官。肝髒是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝髒在機體(ti) 位置和形態結構：肝髒位於(yu) 右上腹，隱藏在右側(ce) 膈下和肋骨深麵，大部分肝為(wei) 肋弓所複蓋，僅(jin) 在腹上區、右肋弓間露出並直接接觸腹前壁，肝上麵則與(yu) 膈及腹前壁相接。肝竇內(nei) 皮細胞（SEC）是肝髒內(nei) 所占比例最高的非實質細胞，位於(yu) 肝竇腔與(yu) 肝細胞之間，具有物質轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由於(yu) 擁有一般細胞所沒有的窗孔結構、細胞間連結鬆散、內(nei) 皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，從(cong) 而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時，肝竇內(nei) 皮細胞窗孔逐漸減少或消失，內(nei) 皮下基膜形成，產(chan) 生類似於(yu) 連續型毛細血管的結構，這一過程稱為(wei) 肝竇毛細血管化。它由多種因素引起，其過程極複雜，在多種肝病的發病前期階段均有出現，近年來受到廣泛關(guan) 注。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：