大鼠原代骨髓來源內(nei) 皮祖原代細胞

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：大鼠

組織來源：骨髓骨髓

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:大鼠骨髓來源內(nei) 皮祖細胞采用衝(chong) 洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來。大鼠骨髓來源內(nei) 皮祖細胞分離自骨髓；骨髓是機體(ti) 的造血組織，位於(yu) 身體(ti) 的許多骨骼內(nei) 。成年動物的骨髓分兩(liang) 種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與(yu) 抑製各種病原體(ti) ，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能製造抗體(ti) 。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在於(yu) 長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀鬆骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chan) 生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為(wei) 紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最後幾乎隻有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nei) 皮祖細胞是血管內(nei) 皮細胞的前體(ti) 細胞,在生理或病理因素刺激下,可從(cong) 骨髓動員到外周血參與(yu) 損傷(shang) 血管的修複研究顯示,內(nei) 皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷(shang) 愈合等方麵均發揮重要作用，並為(wei) 缺血性疾病的研究治療提供了新思路。內(nei) 皮祖細胞具有遊走特性，能進一步增殖分化的幼稚內(nei) 皮細胞，缺乏成熟內(nei) 皮細胞的特征性表型，不能形成管腔樣結構。其功能主要為(wei) 參與(yu) 了出生後缺血組織的血管發生和血管損傷(shang) 後的修複。

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

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