細胞培養(yang) 操作:

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang)
傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態
傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1:2傳(chuan) 代,1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿
傳(chuan) 代方法:
1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中,輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後,吸出多餘(yu) 消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後,再加入5ml培養(yang) 基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代,然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL,置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ;
4.待細胞貼壁後,培養(yang) 觀察;之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。
商品屬性:

規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3459 |
種屬來源 | 大鼠 | 組織來源 | 陰莖 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態特征 | 成纖維細胞樣 |
形態:成纖維細胞樣
培養(yang) 基:大鼠海綿體(ti) 平滑肌細胞wan全培養(yang) 基
培養(yang) 環境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳(chuan) 代特征:可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態

細胞基本屬性:

種屬來源:大鼠
組織來源:陰莖陰莖
生長特性:貼壁生長
產(chan) 品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
產(chan) 品貨期:6周左右
運輸方式:T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞(包郵)
供應限製:僅(jin) 限於(yu) 科學研究,絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用
背景介紹::大鼠海綿體(ti) 平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法製備而來,大鼠海綿體(ti) 平滑肌細胞分離自海綿體(ti) 組織;海綿體(ti) ,又稱海綿體(ti) 肌,是最硬的平滑肌和結締組織。海綿體(ti) 是一種勃起組織,外麵包有堅厚的白膜,內(nei) 部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與(yu) 血管相通。它主要包括海綿體(ti) 內(nei) 皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌於(yu) 海綿體(ti) 細胞外基質的膠原中,在消化海綿體(ti) 組織時,膠原酶的作用主要是鬆解海綿體(ti) 內(nei) 皮細胞與(yu) 基膜的聯係,破壞海綿體(ti) 內(nei) 皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體(ti) 平滑肌細胞。平滑肌,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體(ti) 動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養(yang) 3天後,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周後細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐(feng) 富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為(wei) 旋渦狀或柵欄狀。傳(chuan) 代後細胞生長較快,4-6天即可匯合,並保持上述形態學特征和生長特點。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括:

一、剝離組織,去除外膜、結締組織等:將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出,並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。
二、洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊:使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織,然後將其剪成約1mm大小的小塊。
三、用0.1%~0.2%的消化:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩衝(chong) 液中,進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。
四、吹打分散後,過濾、計數:將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中,然後過濾、計數。
五、按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) :將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。
公司正在出售的產(chan) 品:
