大鼠原代晶狀體(ti) 上皮原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：大鼠

組織來源：晶狀體(ti) 晶狀體(ti)

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰蛋bai酶

產(chan) 品貨期：4周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:大鼠晶狀體(ti) 上皮細胞采用胰蛋bai酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，並通過上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來。大鼠晶狀體(ti) 上皮細胞分離自晶狀體(ti) 組織；晶狀體(ti) 源自胚胎發育外胚層，僅(jin) 含有上皮細胞及其產(chan) 物，晶狀體(ti) 囊膜作為(wei) 屏障將晶狀體(ti) 與(yu) 其它類型細胞分開；因而，晶狀體(ti) 上皮細胞培養(yang) 既無神經和血管組織的幹擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的汙染，保證了培養(yang) 中細胞成分的單一性。晶狀體(ti) 上皮細胞主要負責調節晶狀體(ti) 的生理平衡，包括電解質和液體(ti) 的輸送。在正常的發育過程中，晶狀體(ti) 上皮細胞分化和成熟，然後遷移到晶狀體(ti) 內(nei) 部，產(chan) 生晶體(ti) 蛋白，自身也拉長而變成晶狀體(ti) 纖維細胞，並最終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明，晶狀體(ti) 上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體(ti) 中的生長因子的調控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁後為(wei) 扁平不規則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體(ti) 上皮細胞是緊密貼附於(yu) 晶狀體(ti) 前囊內(nei) 表麵的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與(yu) 白內(nei) 障和後囊混濁的發生密切相關(guan) ，體(ti) 外培養(yang) 是研究其生長規律的主要手段。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：