大鼠原代乳腺上皮原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：大鼠

組織來源：乳腺乳腺

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:大鼠乳腺上皮細胞采用胰蛋bai酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，並通過上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來。大鼠乳腺上皮細胞分離自乳腺組織；乳腺位於(yu) 皮下淺筋膜的淺層與(yu) 深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內(nei) 形成條索狀的小葉間隔，一端連於(yu) 胸肌筋膜，另一端連於(yu) 皮膚，將乳腺腺體(ti) 固定在胸部的皮下組織之中。乳房腺體(ti) 由15-20個(ge) 腺葉組成，每一腺葉分成若幹個(ge) 腺小葉，每一腺小葉又由10-100個(ge) 腺泡組成，這些腺泡緊密地排列在小乳管周圍，腺泡的開口與(yu) 小乳管相連。乳腺上皮細胞來源於(yu) 乳腺小葉中。它們(men) 與(yu) 腺體(ti) 導管和脂肪組織一起在乳腺中形成複雜的網絡結構。乳腺上皮細胞在人和動物體(ti) 出生、發育和妊娠中均會(hui) 受荷爾蒙調控而進行一係列的增長、遷移和分化。激素水平失調、細胞外基質的變化和其它的基因因素都會(hui) 導致乳腺上皮細胞惡性增長，最終導致乳腺癌的發生。了解乳腺上皮細胞的特性可以幫助我們(men) 理解乳腺癌的病例機製以及為(wei) 治療確定新的靶點。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：