HCC-LM3人高轉移肝癌細胞細胞係
英文名稱 | HCC-LM3 | 規格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 | 貨號 | E2009 |
用途 | 僅(jin) 供科研研究實驗 | 貨期 | 現貨 |
別稱 LM3; MHCC-LM3; MHCCLM3
年齡（性別） 39歲
組織來源 肝；肝癌
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
背景描述 HCCLM3細胞是一株由人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠、進行3次肺轉移篩選、取肺轉移瘤建成皮下接種後高度自發性肺轉移的肝癌細胞係。HCCLM3細胞被廣泛用於(yu) 人肝癌發病機理的基礎和臨(lin) 床研究，也可用於(yu) 抗腫瘤藥物篩選。
生長培養(yang) 基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳(chuan) 代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~35-48 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
1)複蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yang) 基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yang) 基，培養(yang) 過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。
2)細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
a、棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2 min(視細胞情況而定)，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加2-3ml*培養(yang) 基終止消化。輕輕打勻後裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yang) 液後吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yang) 基的新皿中或者瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 例;
a、收集細胞及細胞培養(yang) 液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yang) 液是否有漏液、渾濁等現象，幹冰運輸的細胞檢查幹冰是否*揮發，細胞是否解凍，若有上述現象發生請及時和我們(men) 聯係。
2. 仔細閱讀細胞說明書(shu) ，了解細胞相關(guan) 信息，如細胞形態、所用培養(yang) 基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yang) 條件一致，若由於(yu) 培養(yang) 條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由於(yu) 溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。.觀察好細胞狀態後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yang) 基重懸細胞，並接種到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，置於(yu) 培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。
5. 請客戶用相同條件的培養(yang) 基用於(yu) 細胞培養(yang) 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便於(yu) 和我司技術部溝通交流。由於(yu) 運輸的原因，個(ge) 別敏感細胞會(hui) 出現不穩定的情況，請及時和我們(men) 聯係，告知細胞的具體(ti) 情況，以便我們(men) 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決(jue) 。
7. 該細胞僅(jin) 供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yang) 基(灌液培養(yang) 基)不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的*培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。 收到細胞後次傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代 。
9. 注意： 1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿。
兔肺成纖維細胞 | 人小細胞肺癌細胞DMS 114 (STR鑒定正確) |
人視網膜微血管內(nei) 皮細胞 | 小鼠黑色素瘤細胞帶綠色熒光B16-F10+GFP（種屬鑒定） |
小鼠胚胎成纖維細胞 | 人骨髓瘤細胞U266 (STR鑒定正確) |
大鼠外周血來源內(nei) 皮祖細胞 | 人非小細胞肺癌細胞熒光素酶標記 HCC827+luc (STR鑒定正確) |
小鼠肝外膽管上皮細胞 | 人胚腎細胞HEK-293(STR鑒定正確) |
大鼠NG2細胞 | 人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2(STR鑒定正確) |
人角膜成纖維細胞 | 人卵巢癌細胞HO-8910（STR鑒定正確) |
小鼠骨髓間充質幹細胞 | 人卵巢癌順耐藥株SKOV3/DDP(STR鑒定正確) |
大鼠骨髓間充質幹細胞 | 人膽囊癌細胞GBC-SD(STR鑒定正確) |
人小梁網細胞 | 人胚腎細胞-F克隆 293F(STR鑒定正確) |
小鼠肝枯否細胞 | 人乳腺癌細胞JIMT-1(STR鑒定正確) |
大鼠肝枯否細胞 | 人肺癌細胞A549(STR鑒定正確) |
人視網膜Muller細胞 | HCC-LM3人高轉移肝癌細胞細胞係人結腸癌細胞帶熒光素酶 HT-29+LUC(STR鑒定正確) |
大鼠海綿體(ti) 內(nei) 皮細胞 | 人乳腺癌細胞Bcap-37(STR鑒定正確) |
人角膜內(nei) 皮細胞 | 人B淋ba細胞急性白血病細胞BALL-1 (STR鑒定正確) |
